吸水链霉菌17997基因阻断变株发酵产物的HPLC型分析.pdfVIP

第21分会场 生物技术产业化421 ：=： mg／L，也超过一般养虾池养鱼池的较高水平。根据我们调 质标准(5mg／L)f拘13倍。最低值也有20．8 查，轮虫天然高产水域都是含有大量有机污染物的水域，这种水域大量的有机碎屑和细菌，是轮虫高产 的饵料基础。 (三)静水池塘和半循环水池塘的比较 单从静水池塘(18池)和半循环水池塘(68池)的水化学指标来比较分析，看不出有明显的区别， 不论是随时间的变化趋势还是绝对含量都很相近。但半循环水池塘在轮虫高峰期El平均产轮虫量 (165kg·hm 单胞藻的新水，可供给轮虫饵料，提高水中溶氧，同时吸收部分轮虫的代谢产物；排出老水，可减轻代谢产 物对轮虫的压力。这样较好地处理了浮游植物与轮虫之间的关系：既保持池中有一定量的浮游植物，有较 强的供饵能力，又保证轮虫具有一定的现存量，使它们尽量维持高水平上的平衡，延长轮虫的高峰期，提高 产量。而静水池由于饵料缺乏，轮虫代谢产物积累等问题，产量和高峰期持续时间明显低于半循环水培养 池。而且池水长期静止，能使水分子链结构变长，水活力变差，动植物体新陈代谢减弱，影响生长发育。 参考文献 1 金送笛．哈尔滨地区高产鱼池水质研究(一)：水化学与初级生产力．大连水产学院学报，1984(1)： 1～13 2林荣根．虾池水体的富营养化及防治对策．海洋学报，1997，19(6)：127～133 3 王崇明．对虾池塘浮游植物与主要水质因子的关系．海洋科学，1993(4)：10～12 4 王金秋．pH值对萼花臂尾轮虫种群增长及繁殖的影响．应用生态学报，1997，8(4)：435～438 5 杨逸萍．精养虾池主要水化学因子变化规律和氮的收支‘．海洋科学，1999(1)：15～17 6 臧维玲．中国对虾池溶解氧的收支平衡状态．海洋学报，1995，17(4)：137～141 7 张文明．年轻之水——活水对生物及水产养殖的影响．水产养殖，1996(3)：25～26 作者简介 窦亚秋，盘锦市水产学会会员，高工，中国海洋大学农业推广硕士在读。电话：0427— 2288390，传真：0427—2822601；E—mail：douyaqiu2004@163．corn。 吸水链霉菌17997基因阻断变株发酵产物的HPLC型分析 李京艳 赫卫清 杜 煜 武临专 高群杰 孙桂芝 王以光 中国医学科学院医药生物技术研究所，北京，100050 摘要 以吸水链霉菌17997为出发菌株，分别阻断其基因簇中与格尔德霉素(GA)起始 单位生物合成相关的3一氯基5．羟基苯甲酸(AHBA)合酶基因及与之相连的PKS，并阻断含GA 聚酮体后修饰基因-氨甲酰基转移酶基因的PKS基因，分别得到3个变株AHBA—gdn，AH。 BA—shn和CT—PKS基因阻断变株。变株发酵产物经乙酸乙酯提取和HPLC分析，表明 莎类化合物。同时还发现一些变株产生的可能为新的化合物。本研究表明采用反相HPLC 梯度洗脱系统可以最大限度的呈现基因阻断株发酵代谢产物的变化，根据HPLC中新出现的 422 以科学发展观促进科技创新(下) 吸收峰可以跟踪不同基因阻断株产生的新产物，为化学鉴剐工作提供方向。 关键词 微生物药物学 吸水链霉菌1799基因阻断HPLC GA是一种苯醌安莎类的抗生素，具有抑制肿瘤细胞和广谱抗病毒的作用。近年来证实GA可以特异抑 shock 制热休克蛋白90(heat 衍生物17烯丙氨基格尔德霉素美国已进入Ⅱ期临床研究。本所病毒研究室还发现GA具有广谱抗病 毒活性。 为了获得GA生物合成基因以便为其基因工程改造打下基础，我们利用与GA生物合成相关基因， 以它们的PCR产物作为探针，从构建的吸水链霉菌17997基因文库中获得与GA生物合成相关基因。 和PKS后修饰基因簇，命名为CT—PKS。本文报道以基因阻断技术获得三个基因簇阻断变株，并以 HPLC分析三种变株发酵产物的谱型，以此推断它们与GA生物合成的关系，并发现变株产生的可能为 新的化合物。在一菌产生多种抗生素的情况下，HPLC的谱型分析可为基因阻断变株发酵可能产生的 多种新化合物的分离鉴别提供指引。 一、材料和方法 (一)材料 1．菌种 杆菌和链