糖化血红蛋白的测定方法及其在临床中的应用_培训课件.pptVIP

糖化血红蛋白的测定结果以百分率表示，指的是和葡萄糖结合的血红蛋白（HbA1c）占全部血红蛋白的比例。非糖尿病患者的糖化血红蛋白的水平为4%-6%。 （1）糖化血红蛋白比例高低的决定因素 取决于血糖的浓度 血糖与血红蛋白的接触时间 红细胞的存活时间 血糖浓度越高，接触时间越长，HbA1c的比例越大 （3）可以随机抽血进行检测，简便易行，可重复性好。　　 酶法 原理是在蛋白酶的作用下，切断HbAlc 的β链N末端的糖化二肽，糖化二肽在果糖基肽氧化酶的作用下生成过氧化氢，在过氧化氢酶的作用下与显色剂产生显色反应，通过测定吸光度求出定HbAlc 的百分数。 床旁检验或快速检验（POCT）有2种方法，一种是利用硼酸亲和原理在颜色反射计上进行检测。HbAlc特异性地与硼酸复合物结合呈蓝色，而未糖化Hb呈红色，通过两者光强度的比例计算。另一种是基于免疫反应原理在荧光分析仪上检测含HbAlc 的荧光染料分子的斑点数，换算成HbAlc 的数值。此方法便携、快速，但精密度较其他方法要差。 干扰因素 1. Hb的变异体对HbAlc 测定的影响 常见的变异体有HbF即Hb的?链由γ链替代：如地中海贫血、镰状细胞病患者。还如HbS、HbC、HbE等。Hb的变异体会随着HbAlc 一起洗脱而影响HbAlc的测定值。 2. Hb的化学修饰产物 最常见的是氨基甲酰化Hb(肾病患者)和乙酰化Hb(接受阿司匹林治疗者)。氨甲酰化为高浓度尿素在体内形成异氰酸,结合到Hb N末端氨基酸上，形成氨基甲酰血红蛋白。其与HbAlc的等电点相似，使得HbAlc 测定结果假性升高。 有关报道，此法测定HbAlc时，如果尿素浓度超过17mmol/L，每升高1mmol/L会使测定值升高0.04%。另外肾病患者常伴有贫血,红细胞寿命缩短,在解释检测结果时，要综合考虑。 3.红细胞生存期的改变 当患有溶血、失血性贫血等时，红细胞代谢加快，HbAlc值通常下降。缺铁性贫血时，衰老的红细胞所占的比例增高， HbAlc值会假性增高。 全自动糖化血红蛋白测定装置ADAMSTMA1c　 HA-8160 HA-8160的技术参数　 测定对象：　　　全血 测定项目：　　　HbA1c、HbA1、HbF及图样 测定原理：　　　逆相分离阳离子交换层析柱 样本使用量： 约 4uL（全血样本） 样本容器： 采血管（ EDTA，NaF、肝素） 必须样本量： 采血管 1mL 　　　　　　 　　　　　　　　　 HA-8160的特点　 HPLC法： 高速分离稳定性HbA1c，特异性强、精密度高。 自动去除不稳定性HbA1c 同时测定HbA1、HbF 能发现变异Hb，修饰Hb 高速测定：90秒/样本 HbA1c的测定范围在3～20%之间。 影响测定结果的标本因素 测定前标本的储存 室温（15-25℃）下保存2周，冰箱 （2-8℃）保存1个月，测定结果的变异率均低于3%，稳定性良好。 HbA1c通常用翻倒混合的血或者自然沉降血球。 如用和血糖测定共用NaF抗凝采血管，也可用离心分离的血球。但要在700g (1500rpm)、5min左右温和的离心条件下做前处理，否则HbA1c的测定值有若干偏高的情况出现。 对于非重度溶血标本，可进行测定。 HPLC分析图中可出现变性峰形。 存在未检出结果的情况 贫血患者当Hb浓度太低时＜65g左右，低于最低检出量，可采取低速离心后适当弃去部分血浆调节Hb浓度至正常水平。 HbA1c的临床应用 一 糖尿病诊断 DM的诊断标准： DM (1)具有糖尿病的症状，FPG＞7.0mmol/L （2）具有糖尿病的症状，随机血糖＞11.1mmol/L，且伴有尿糖阳性者。 (3)OGTT峰值＞11.1mmol/L，OGTT2hPG＞11.1mmol/L IFG FPG 6.1-6.9mmol/L，2hPG＜7.8mmol/L。 IGT FPG＜7.0mmol/L， 2hPG7.8-11.1mmol/L 临床症状不典型者，需要另1d重复检测确诊，但不主张做第3次OGTT。 我国有文献报道， HbA1C诊断GDM的最佳cut off值4.9%，他的特异性和敏感性均高于80%，诸多研究显示，孕期 HbA1C 升高的水平与孕期母婴健康关系密切。但HbA1C 并未被推荐作为GDM的诊断指标之一。这还需进行更广泛的临床验证。（妊娠期由于红细胞周转加快，红细胞寿命缩短，空腹血糖降低，使得糖化时间缩短，导致妊娠期HbA1C生理性下降）。 二 监测糖尿病患者长期血糖的控制状况 对于血糖控制状态较为平稳的患者，每年至