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DNA提取技术在法医学的应用与进展论文.doc

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DNA提取技术在法医学的应用与进展论文.doc

  DNA提取技术在法医学的应用与进展论文 【摘要】 DNA鉴定技术在现代法医物证检验中有着广泛的应用,其应用分子生物学的方法,对犯罪现场遗留的生物物证所含的DNA与犯罪嫌疑人的DNA样本进行比对,鉴定DNA结构是否相同,从而对生物物证是否来自于犯罪嫌疑人作出评价。不过大多犯罪现场遗留的生物样本存在着许多不利于法医提取的因素,比如腐败、变质、污染等。本文就现场DNA提取纯化技术方面来介绍当今法医学的技术进展。 【关键词】 DNA 提取 硅珠 磁珠 自从20世纪80年代DNA技术问世以来,改变了过去对生物物证的检验只能“否定”不能“认定”的历史。利用DNA鉴定技术,可以直接“认定”犯罪现场的血迹、精斑、毛发、唾液斑等生物检材是否为犯罪嫌疑人所留.freel的磁性纳米粒子,使其具有很高的磁场响应能力和超顺磁特性,能够通过改变外磁场实现纳米调控;然后利用包覆技术,对磁性纳米粒子进行包覆,为进一步修饰功能团提供载体,减少与生物组织的非特异性作用,对内部的磁性纳米粒子起到保护作用;接着利用表面化学修饰技术,连接可特异地与DNA发生作用的功能团10,修饰的功能团必须具有对DNA可逆吸附的特性,从而实现控制DNA吸附、解离和减少与其它杂质非特异性吸附的目的;最后通过表面修饰和溶液中离子强度、pH等条件的控制,使每次操作均能获得准确数量DNA,保证后续检测分析的高成功率。 磁珠法提取纯化DNA的原理与硅珠相近11,13,先利用硫氰酸胍等强烈蛋白变性剂,破坏细胞膜及核膜蛋白,释放DNA,并使核酸酶失活;然后加入磁珠通过表面的化学集团与DNA特异性吸附,而蛋白质等杂质不被吸附而留在容夜里;接着在磁场的作用下,磁性颗粒与液体分开,回收颗粒;最后再用纯水或TE洗脱吸附的DNA,在溶解液中进行DNA与磁珠的解离,将DNA重新溶出。 与其他常见提取方法比较,磁珠法有着显著的优势9,12:1纳米材料具有小尺寸效应和表面效应,能够用于高效DNA提取,满足微量生物样本DNA提取的要求,实验表明,即使是0.5μL血仍能得到DNA分型,而同样的血量用CHELEX提取DNA优势不能得到分型,甚至当溶液中DNA含量仅为100pg时,DNA回收率仍然达到90%以上13;2纳米材料表面能够进行化学修饰,从而与DNA进行特异性吸附,去除样品DNA溶液中的PCR抑制物质,如有机溶剂、去污剂、金属离子、染料等;3纳米粒子表面功能团数量可以控制,获得所提取DNA溶液的浓度信息,实现定量的要求;4磁性纳米材料可以通过特殊的合成工艺,使其具有超顺磁特性,因此能够通过仪器进行自动化操作,满足数据库建设大批量样本提取的需要,减少人为因素影响14;5用时少,操作简单,适用于大多数生物检材。对于经验较少的初学者而言,按照简单的程序化操作,也能够获得满意的DNA提取结果;6价格低廉,便于广泛应用。由于纳米材料合成采用的都是低价无机和有机原料,无须特殊的仪器设备,使得最终的合成和研发成本都很便宜。 DNA鉴定技术作为法医鉴定的重要手段,它的科学性和实用性已得到广大司法部门和社会各界的一致认可和高度重视。目前运用DNA技术在刑事案件以及各种案件中进行检验已经是常用手段之一。而以上介绍的技术也只是整个鉴定技术的一环,样本的收集、STR分型等一系列步骤的每个因素都可能影响DNA分析结果。不过相信在科学技术迅猛发展的今天,国内外学者会研究出更多更灵敏,更简便,更经济的方法,来未法医学界或者更大的领域服务。 参 考 文 献 1董林芳, 裴黎, 余政, 彭健雄, 冯涛. 联合应用chelex100 和磁珠法检测霉变皮上衣微量DNA 1例J. 刑事技术. 2008; 6: 68-69. 2莫耀南, 薛小琦, 刘良. 3种DNA提取法在污染严重混合斑分型中的应用比较J.中国法医学杂志. 2008; 23(1): 26-28. 3etzger DA, Higuchi R. Chelex-100 as a medium for simple extraction of DNA for PCR based typing from forensic material J. Biotechniques. 1991 Apr; 10(4): 506-513. 4Oota H, Saitou H, Matsushita T,.freelains of a 2000-year-old human population in China and its relevance for the origin of the modern Japanese population. Am J Hum Ge. 1999 Jan; 64(1): 250-258. 5Schneeberger C, Kury

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