应用固定化酵母技术发酵甜高粱茎秆汁液制取生物酒精的研究.pdfVIP

应用固定化酵母技术发酵甜高梁茎秆汁液制取生物酒精的研究 沈飞，刘荣厚， (上海交通大学农业与生物学院生物质工程研究中心，上海 201101) 摘要:本文以 “沈农甜杂2号”甜高粱为原料，通过不同固定化粒子填充率水平下的酒精发酵试验， 结果显示，固定化粒子填充率为25%时为较适的填充率水平，在此条件下，总发酵时间为8h，酒精 得率为89.16%:通过在此条件下的固定化酵母和游离态酵母的发酵甜高粱茎秆汁液的对比试验显示， 固定化酵母酒精发酵总的发酵时间较游离态酵母缩短近2/3，固定化酵母发酵的酒精得率为85.34%, 而游离态酵母发酵的酒精得率为81.02%0 关键词:甜高粱;固定化;酒精发酵 1引 言 随着化石能源的日渐枯竭和环境污染的日渐严重，利用能源作物生产生物液体燃料受到世界各 国的高度重视m[。从农作物中获取的酒精，称之为生物酒精，由于其原材料的可再生性，而引起了 人们的广泛兴趣21「.甜高粱是生产酒精原料中较为有前景的原料之一(31.甜高粱{Sorghumbiocolor (L.)dfoench}是一种C;作物，具有很高的光合作用速率，同时与高粱的其他种属相比，甜高粱具有 较高的生物学产量和糖产量]’[.就生物学特性而言，甜高粱生物学产量较高，一般茎秆产量45000^- 75000kg/hm2，还可产3000-6000kg/ho?的籽粒;抗逆性强，一般甜高粱具有很强的抗早和耐涝性， 同时甜高粱还具有较强的抗盐碱能力:适应范围广，只要10℃以上的积温i彝ll1500^-2500-C，选择 合适的品种，在一般耕地、草原、轻盐碱地均可种植。作为能源作物而言，甜高粱的茎秆富汁多糖、 籽粒富含淀粉、秆渣富含纤维素和半纤维素，均为发酵制取生物酒精合适的原料。因而结合其生物 学特性，将其作为一种能源作物，用于生成生物酒精应具有良好的推广和应用前景。 固定化技术是20世纪70年代兴起的一种新型生物技术，所谓的固定化细胞技术就是指利用物 理或化学手段将游离的细胞或酶与不溶性载体相结合，使其保持活性并可反复使用的一种技术，它 包括固定化酶技术和固定化细胞技术。该技术可以大幅度提高参加反应的微生物浓度，催化效率高; 减少使用微生物的数量;微生物被高分子材料包埋，耐环境冲击;产物分离提取容易;操作稳定性 好，因而受到人们越来越多的关注51〔0 传统的酒精发酵工艺，采用游离细胞发酵，酵母随发酵醒不断流走a【，造成发酵罐中酵母细胞 浓度不够大，使酒精发酵速度慢，发酵时间长，而且所用发酵罐也多，设备利用率不高。而采用固 定化细胞，在发酵罐中的酵母细胞浓度就很大，发酵速度比游离细胞发酵快得多。当采用连续发酵 时，将酵母细胞固定在一个发酵罐中，一边进糖液，一边排出成熟发酵醒液。这样利用一个发酵罐 就可取代原来数个发酵罐的作用，设备利用率较高，而且减少了设备投资(71e 据测算，由甜高粱茎杆采用土法制酒精的成本为2800^-3000元八，而采用先进的技术后，其成 本还会大幅降低81【。因而，本研究将固定化酵母技术和甜高粱的优势相结合，对于进一步降低甜高 粱茎秆汁液制取生物乙醇的生产成本以及开发甜高粱资源发展生物乙醇具有重要的实际价值和意 义。 2材料与方法 2.1供试品种 供试品种为 “沈农甜杂2号”甜高粱，采自上海交通大学农业与生物学院农场，采收于2005年 12月4日，其茎秆经压汁后，向汁液添加(NH4)2S04:0.2%,KZHP04:0.125%,M9S04:0.05%等无机营 基金项目:欧盟资助项目(ICA4-2002-10023) .s讯作者:Email:liurhou@sjtu.edu.cn.Te10:21 养盐并灭菌，冷却后备用。 2.2菌种 南阳酵母 (Saccharomycescerevisiae)，上海交通大学生物质工程研究中心保藏。 2.3固定化材料 海藻酸钠 (AR),氯化钙 (AR)和戊二醛 (BR)等s(10 2.4发酵试验设计 将发酵过程中的温度、转速和pH值设定成固定值，取不同水平的固定化粒子填充率，进行甜高 粱茎秆汁液酒精发酵试验，以便确定固定化酵母甜高粱茎秆汁液酒精发酵过程中较适合的粒子填充 率;同时，选取固定化酵母和游离态酵母两种方式，并按照酵母等量原则，分别在5L机械搅拌式的 生物反应器中进行酒精发酵对比试验。发酵过程中定时测定发酵液中酒精含量和总糖含量，对比发 酵过程中原料的酒精转化率和发酵时间。 2.5试验仪器和设备 本研