如何发展手性药物的工业生物技术论文.pdfVIP

如何发展手性药物的工业生物技术 杨顺楷 杨亚力 中国科学院成都生物研究所，四川成都，610041， 1 Fax：028 Tel：028-8522393， yangsk@cib．ac．cn 一、手性技术的产业背景 上世纪60年代初，发生在德国医学界震惊全球的“反应停”(沙利度胺， thalidomide)悲剧事件导致了人们对手性化学及其分子药理、毒理学的空前重视， 把药品及其相关的精细化学品的安全性的关注提高到空前的高度。这才导致在过 去的30多年来，特别是上世纪80年代中期以来，人们“才真正萌发了这样一种思想， 即我们应该将单一对映体比消旋体做得更好”；故自1990年以来，全世界批准的新 化学实体(NCEs)中，单一对映体药物的比例一直大于消旋体的比例。这样，手性 药物及其精细化学品全球市场驱动了整个“研发链”，导致全球性手性药物的研究与 开发成为了新药发展的重要方向和热点领域。据统计，1996手性药物世界市场为 730亿美元；1999年为1 美元的36％。选择手性药物开发战略的主要依据是手性药理学研究结果，同时还 应综合评估其“技术可行，经济合理”的标准。 手性化合物的生物合成是手性药物生产取得突破的关键技术，它是利用酶促 反应或微生物转化的高度立体、位点和区域选择性，将有机合成的外消旋衍生物、 前体或预手性化合物生物转化成单一光学活性产物。优点为反应条件温和(通常 无环境污染。 推动手性药物发展的决定因素是基础生物化学，特别是酶学研究的进展。在 自然界，特别是在生物体中，手性化合物的一对对映体存在量是有差别的，有的 仅以单一对映体存在。例如，构成蛋白质的氨基酸均是以L一氨基酸，而组成多糖 和核糖的单糖则是D．单糖；许多天然产物手性小分子也主要以一种对映体存在。 这种现象称为手性优择：手性优择是自然界的一种属性，它使得作为生命活动重 要基础的生物大分子(如核酸、蛋白质、酶、多糖和受体等)都具有不对称性， 也造成酶仅只催化特定底物的反应，受体仅与特定手性小分子化合物结合。 药物化学和分子细胞药理学家试图影响生物信使分子和细胞表面受体，即药 物作用的靶分子均是手性的，因此药物分子必须与这些靶分子进行严格地手性识 别和匹配才能发生药理作用。在许多情况下，具有手性的一对对映体在生物体内 的药理活性、代谢过程、代谢速率和毒理等均存在显著的差异。通常情况下，只 有一个对映体具有药理活性，而另一个对映体无显著的药理作用，或具有完全不 同的生理活性，或有严重的毒副作用。总之，自然界生命有机体的手性属性决定 了药物的存在，基础科学研究的进展推动着手性药物的发展。 在此背景下，近些年来手性技术不断地取得进步，技术体系日臻成熟，世界 手性药物市场以前所未有的速度迅猛发展，这预示着我国制药行业的希望所在。 本着“有所为，有所不为”、“突出特色、自主创新”的精神，将我们实验室近二十年 来在手性药物生物合成研究开发方面的三项工作进行介绍，共同研讨，有助于推 动我国制药技术中工业生物技术的发展。 1 二、手性药物合成中的生物转化——手性药物生物技术的基础 1．转化反应类型：主要涉及氧化反应，包括羟基化(脂肪族、芳香族)，环氧 及氧化性脱氢作用，水解(酯、酰胺、氨基甲酸酯、环氧化物)，还原(酮类、链 脱氨之逆反应——对芳基丙烯酸直接氨化反应。 2．方法学：主要包括建立一般微生物转化的通用程式及相关方法 3．工业生物技术的发展主要包括三个关键问题的研究，即微生物资源库和微 生物功能基因组学，生物催化剂快速定向改造技术，以及重要工业微生物的代谢 工程；其核心是工业生物催化技术，包括酶的发现、酶的优化和生物催化工程三 个主要的技术平台，其中以生物催化工程技术平台的搭建最为关键，且又是我国 目前较为薄弱的环节。 三、手性药物生物技术的三个实例 1．红酵母PAL酶法转化肉桂酸生产L．Phe的研发历程为例，说明手性药物及 精细化工产品L．Phe是如何实现从斜面菌种到工业试生产线产出百吨级合格产品 2．介绍新月弯孢霉新工艺——对甾体底物RSCnl3．羟基化过程研究的新进展， 有效提高氢化可的松产率