一种松茸人工菌塘的建立方法.pdfVIP

爨蕊麟隧 糯穆蝴 栽搬，培烽 技m 术Ⅻ 噍固萄 2010(3) 一种松茸人工茵塘的建立方法 伦志明1 李玉花2 徐 军1 傅禄敏2 (1黑龙江农业经济职业学院食用菌研究所，黑龙江牡丹江157041；2东北林业大学花卉生物工程研究所，黑龙江哈尔滨150040) 摘要 通过母种分离培养、液体菌种制备、菌丝土壤纯培养 体从菌柄基部向菌盖处撕开，用消毒镊子夹取或手术刀片切 物制备和野外菌塘诱导建立等过程，建立一种松茸人工荫塘的 取菌褶或菌盖与菌褶之间的菌肉组织一小块一菌褶四到五片、 制作方法，以促进松茸出产林地菌塘的形成，为人工林地驯化 菌肉稻米粒大小，放入试管或培养皿中央，23℃±2℃培养箱中 栽培松茸提供一种更有效的途径。 黑暗静止培养，7周后进行转接培养，培养基与分离时相同。 关键词 松茸人工菌塘 建立方法 2液体菌种的制作与培养 文章编号 1000-8357(2010)03—0054-02 制作不加琼脂粉的Ohta液体培养基，分装入锥形瓶中，装 et 量为瓶容积的l陀左右，用聚丙烯塑料薄膜和棉线蝇封口，121℃ matsutake(S．ho 松茸[T渤ho／oma Imai)Sing．1是一种珍 稀的外生菌根型食用菌，因其生活过程与木耳、平菇等腐生菌 高压灭菌20min，冷却后在无菌条件下用打孔器从培养皿中的 不同，必须要有活的树木根系共生才能结实，因此人工驯化栽 松茸菌落边缘打下直径为8mm的圆形菌块，接入培养基内， 培比较困难，目前国内依然完全依赖野生资源。关于松茸人工 23℃±2℃培养箱中暗培养。待瓶内长满菌丝球时取出锥形瓶。 栽培研究的历史已经有一百年之久．2008年有报道称，日本3菌丝土壤纯培养物的制备 TAKARA 3．1 茵丝浆的制备 BIO公司已经成功培育出松茸菌块，这意味着本来 只能野生的松茸将可以进行人工栽培。然而这家基因技术公司 3．1．1 榨汁机的消毒 用来制备菌丝浆的榨汁机应带有旋转 所开发的人工栽培技术目前还没有进入实际应用阶段。国内目 刀片，其消毒方法为：首先，打开榨汁容器的盖。将盖翻转倒放 前研究得更多的是依托松茸出产林地，采用人工促繁技术和半 在超净工作台上，与榨汁容器一起用紫外灯照射20min；其 人工栽培技术来提高松茸的产量，而且收效明显。这些技术都 次。再用70％酒精喷洒容器内壁，晾30min；最后，用O．1％次 是通过保护松茸菌塘和促使菌塘生成的方法来达到目的。所谓 氯酸钠溶液喷洒容器内壁，晾40rain。 菌塘是由密生的白色或灰白色菌丝体与植物根系及土壤颗粒 3．1．2菌丝浆制备将前面培养有菌丝球的锥形瓶取出，放 相互交错纽结而成的团状结构。这里既是松茸菌丝体与宿主植 入超净工作台上，用药匙将瓶中的菌落移人消毒后的榨汁机 物共生并进行营养交换的场所，也是其进行核配与分化并形成 中，并加入新鲜的Ohta液体培养基(培养基与菌丝体积比为 003 子实体原基的地方，因此菌塘是松茸完成其整个生活史不可缺 l：1)，最大转速(10drain)下打碎3次，每次3s。将制得的 少的场所。现介绍一种松茸人菌塘的建立方法，以期为广大从 菌丝浆倒入一个空的无菌锥形瓶中，封好后继续培养，3d后 事松茸人工栽培技术的研究人员提供参考与借鉴。 取出菌丝浆，用不加糖的Ohta液体培养基冲洗菌丝3次，然 1母种的分离与培养 后将菌丝加入同样不加糖的Ohta液体培养基中(培养基与菌 丝体积比为l：1)，备用。 1．1培