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维普资讯
果 树 学 报 2008，25(2)：236～239
JournalofFruitScience
农杆菌介导霞多丽葡萄胚性细胞系
遗传转化条件的优化
邓 杰，曹银生，刘彩玉，刘 新，薛仁镐
(青岛农 、I大学生命科学学院．山东青 岛 266109)
摘 要：为建市葡萄 (Vitist,infieFa)遗传转化技术体系，以霞多丽葡萄(Chardonnay)胚性细胞系为靶组织 ．采用GUS
检测法，对影响农 菌介导葡萄遗传转化效率的主要 因素进行 了研究。结果表 明，超声波处理时间长短对转化效率
有较大影响，在所试的0．5、1、5、10min4种不同时问的超声波处理中，以5rain时转化效率较好 ，平均达到 9．11个蓝
色斑点；AS浓度对转化效率有 明显差异，当浓度为 50~Lmol／L时，平均蓝色斑点数为 8．89个 ，100 mol／L时，达到
12．44个 ；Drrr质量浓度对转化效率也有较大影响 ．存所试 的3种质量浓度 (1_2，3mg／I)中，以3mg／L为最佳 ．有
16．67个蓝色斑点。通过GUS瞬时表达检测 ，确立 了农杆菌介导葡萄胚性细胞系遗传转化的几个最适影响因素．从而
为葡萄遗传转化技术体系的建立奠定了基础
关键词：葡萄；农杆菌 ；胚性细胞系 ；超声波 ；遗传转化
中图分类号：$663．1 文献标识码 ：A 文章编号：1009—9980(2008)02—236—04
Optimizing conditionsforAgrobacterium -mediated transformation of
Chardonnaygrapecultivar’Sembryogeniccells
DENGJie，CAOYin—sheng，LIUCai—yu，LIUXin，XUERen—gao
(Collegeolf Science，QingdaoAgriculturalU l’ersity，Qingdm,，Shcmdong266109China)
Abstract：Foestablishaiieffic．ienttransformationofgrape (Vitisvin rn)，thefactorsaffectingtheAgrobacterium—mediated
transformationefficiencywerestudiedbyGUSassayusingtheembryogeniccellsasthetargettissue．Theembryogeniecells
weresonicatedandinoculatedwithAgrobm：terium EHA105／pCAMBIA1301，andplacedonCO—culturemedium containing
differenteoneenttationsofaeetosyringoneanddithiothreito1．Thetransientexpressionofthegeneguswasassayedat3or4d
aflerCO—euhivation rtransofrmation．Fhehighesttransformationefficiencywasobtainedwhentheemb~ogeniccellswere
sonieatedofr’5rain．Fheconcentrationofaeetosyringonealsoaffectedthetransformationefficiency．Theaveragebluespots
weredeterminedtobe8．89at50I~mol／LAS．and12．44at100I~mol／LAS．TheadditionofDITrtotheCO—culturemedium
alsoenhancedtransientGUSexpress
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