响应面法优化放线菌BOS-018的液体发酵工艺.pdfVIP

— 458 — 江苏农业科学 2016年第44卷第8期 王 勇,曹艳杰,张文革 响应面法优化放线菌BOS 08 的液体发酵工艺[J] 江苏农业科学,206,44(8):458 46 do :0 5889/j ssn 002 302 206 08 32 响应面法优化放线菌BOS-018 的液体发酵工艺 1 1 2 王 勇 ,曹艳杰 ,张文革 ( 辽宁科技大学,辽宁鞍山 405 ;2 鞍山师范学院附属卫生学校,辽宁鞍山 400 ) 摘要:为了提高放线菌BOS 018代谢产物中有效代谢物质浓度,得到更多的活性成分,并提高其抑菌活性,采用 响应面法来优化放线菌BOS 018 的液体发酵条件 先通过单因素试验确定最佳单因素,再运用Plackett Burman试 验对影响发酵的几个因素进行评价并筛选出3个最主要因素,即温度 接种量和装液量 经最陡爬坡试验,最后运用 Box Behnken设计得到这3个因素的最佳值为:温度27.74℃,接种量13.26mL,装液量102.07mL 优化后,抑菌圈 直径达到22.12mm,相对于优化前提高36.7% 关键词:放线菌;发酵优化;响应面法;Plackett Buman试验;最快爬坡试验;Box Behnken试验 中图分类号:TQ920.6 文献标志码:A 文章编号:1002 1302(2016)08 0458 03 放线菌具有非常高的经济价值,能产生多种多样的抗菌 养条件培养后,将菌液在无菌条件下离心15min,离心条件为 物质 到目前为止,食品 工业 医药和农业上有许多成功的 4000r/min 然后把无菌滤纸片在离心所得的上清液中浸泡 抗生素的使用实例 1 从放线菌中提取有效的抗菌物质来 3min后置于已接种黄瓜枯萎病菌的PDA培养基平板中央, 抑制黄瓜枯萎病成为一条安全 有效的途径,放线菌 BOS 于28℃条件下恒温培养7d后,再分别测量抑菌圈直径,确 018 的次级代谢产物对黄瓜枯萎菌有较明显的抑制作用 放 定最佳发酵条件 6 线菌发酵培养基和发酵条件的优化是工业生产中非常重要 1.2.2 响应面法优化发酵条件 的,是从实验室到工业生产中不可缺少的环节 2 响应面法 1.2.2.1 单因素试验 采用单因素试验依次对培养基 发酵 在试验设计中是一种常用方法,准确 高效且分析性强3 4 温度 发酵时间 装液量 接种量 pH值等液体发酵工艺参数 本实验运用响应面法中的 Plackett Burman设计 最陡爬坡 进行逐一优化 每个处理重复3次,平均3次试验的值 然 试验 Box Behnken设计来对 BOS 018 菌株的培养基配方 后按照上面的方法对致病真菌进行抑菌试验,找到能产生最 和培养条件进行优化,应用 Design Expert.V.8.0.6 软件对 大抑菌圈的单因素发酵培养基和培养条件 条件进行二阶数值模型分析,获得回归方程,效果显著 1.2.2.2 Placket Burman(P B)设计试验 7 在单因素试 验的基础上,选取 N =9 的 P B 试验进行设计,将影响 1 材料与方法 BOS 018 发酵的9个因素作为 P B设计的主要成分 将 1.1 材料 高水平(1)设定为低水平( 1)的1.25~1.50倍,抑菌圈直 1.1.1 菌株 供试菌株:放线菌菌株 BOS 018(从长白山 径作