蛋白质印迹20101129.pptVIP

Western blot 实验技术 概 论 印迹法是指将样品转移到固相载体上，而后利用相应的探测反 应来检测样品的一种方法。 1975年，Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜（NC膜）上，并利用DNA－RNA杂交检测特定的DNA片段的方法，称为 Southern印迹法(southern blot)。 而后人们用类似的方法，对RNA和蛋白质进行印迹分析。 Northern blot: 对RNA的印迹分析 Western blot:对单向电泳后的蛋白质分子的印迹分析 Eastern blot: 对双向电泳后蛋白质分子的印迹分析 Western blot ： 把电泳分离的蛋白质转移到固定膜上，并用抗原抗体反应进行特异性检测的过程。 是集电泳、转印和免疫标记为一体的蛋白质分离检测技术,结合了凝胶电泳的高分辨率和固相免疫测定的特异敏感等特点，可检测到低至1～5ng（最低可到10－100pg）的靶蛋白。 Western blot是检测蛋白质混合溶液中目的蛋白的定性方法，也可作为确定目的蛋白在不同细胞或同种细胞在不同条件下的相对含量的半定量方法 Western blot测定的不是蛋白的绝对含量，只是目的蛋白的相对含量： 目的蛋白的存在与否 特定实验条件下目的蛋白表达量的变化 多种因素影响信号的强弱受，一般仅作为半定量指标 不同目的蛋白由于所用检测