抗菌消炎妇科中药筛选及临床前实验探究.docVIP

抗菌消炎妇科中药筛选及临床前实验探究 　　[摘要]目的 探?妇科生殖系统感染的治疗药物，筛选抗菌消炎效果特别显著的中药。 方法 选择抗菌消炎的4种中药：树参、藤石松、松萝和石仙桃，分别用水提法和醇提法提取其组分，将其提取物配为相同浓度的溶液，分组为中药处理组（n=25）和水CK1、乙醇CK2对照组（n=25）。培养大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和产气大肠埃希菌，采用管碟法测定中药提取液的抑菌圈，评价抑菌效果。结果 4种中药水提液中，抑菌效果最好的是藤石松，对3种细菌的抑制效果都很明显，与对照组差异有统计学意义（P 　　[Key words]Gynecological inflammation；Dendropanax dentiger extract；Lycopodiastrum casuarinoides extract；Antibacterial anti-inflammatory；Screening 孕产妇生殖道感染为常见的妇科疾病。妇科炎症如果没有及时控制，可能导致流产。在孕产妇分娩时及产褥期病原体对生殖道侵袭后，造成局部或全身感染，并由此引发全身炎症反应综合征，造成产褥感染。目前主要治疗药物仍然为抗生素。然而，近年来随着抗生素特别是各种广谱抗生素的大量使用，细菌的不断变异，菌群分布及耐药性也出现了较大的变化 对妇科慢性宫颈炎、盆腔炎等细菌性炎症的临床药物治疗，西医治疗妇科慢性盆腔炎往往难以奏效，而中医中药的治疗有其独特的优势。近几年来，报道了不少中药治疗慢性盆腔炎的有效方剂及方法 本研究对树参、藤石松等4种中药进行抗菌筛选实验，为妇科感染病原细菌治疗提供可靠有效的天然药物。采用中药进行孕产妇生殖道感染预防和抗菌消炎，中药相对于抗菌素和激素类药物，对胎儿发育的影响和风险降低，具有安全、疗效好和经济实用的优点 1仪器与材料 1.1 供试菌种 大肠埃希菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Sa），产气大肠埃希菌（E. coli-aerogenes group） 1.2 供试药用植物 树参（Dendropanax dentiger Merr.）茎组织，藤石松（Lycopodium japonicum Thunb）茎和针叶，松萝（Usnea diffracta Vain）、石仙桃（Pholido-ta cantonensis Rolfe）全株 1.3 实验仪器 数显恒温水浴器（HH-4）国华电器；气浴恒温摇床（THZ-820）国旺仪器；冰箱（容声BCD-185DKA）；超净工作台（SW-CJ-1FD）苏净安泰；生化培养箱（SPX-250B-Z）上海博讯实业有限公司；立式压力蒸汽灭菌器（LS-50HJ）江阴滨江医疗设备有限公司；超纯水器（UPWS-I-10T）杭州永洁达净化有限公司；电磁炉（GCA16）珠海格力小家电有限公司， 牛津杯、试管、培养皿、移液枪、量筒、烧杯、开口瓶、接种环、千分尺等 1.4 培养基 LB液体培养基：蛋白胨10 g、酵母粉5 g、NaCl 10 g， 加纯净水至1000 ml，调节pH值达7.0 LB固体培养基：牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、酵母粉5 g、NaCl 10 g、琼脂15～20 g，加纯净水至1000 ml，调节pH值达7.0，高温高压灭菌，制作培养基 2方法与结果 2.1制备中药提取物 2.1.1药用植物水提液的制备 称取每种供试植物干品20 g，绞碎后置电磁炉（GCA16）中，加超纯水 500 ml，浸泡4 h后，用小火煮 30 min，过滤，离得上清液，残渣再加 500 ml 水煮 30 min，合并滤液，加热浓缩至 50 ml。水提液置立式压力蒸汽灭菌器（LS-50HJ）中高温高压（120℃，30 min）灭菌后放入超净工作台备用 2.1.2药用植物醇提液的制备 称取每种供试植物干品5 g，绞碎后分别置带塞广口瓶中，加入75%乙醇100 ml浸泡48 h，经过滤离心，滤液用旋转蒸发仪浓缩至5 ml（浓度为1 g/ml），醇提液经微孔滤膜（0.22 μm）除菌后放入超净工作台备用 2.2细菌培养基的制备 将培养皿和试管用报纸包好，按照配方配制好固液培养基，然后一同放入高压灭菌锅中灭菌，固体培养基倒入培养皿中制作平板，液体配基倒入试管中 2.3菌悬液的制备 用平板画线法将金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、产气大肠埃希菌分别接种于LB固体培养基上，用封口膜封好，37℃置生化培养箱中培养24 h活化细菌，活化后，用接种环挑取同一菌落的细菌，接种于装有LB液体培养基的试管内，然后置于气浴恒温摇床中37℃培养48 h用作实验菌种 2.4