猪淋巴细胞分离液.PDFVIP

猪淋巴细胞分离液 Cat# : DKW33-P0100/DKW33-P0400 产品介绍 猪淋巴细胞分离液即用型，含有葡聚糖，它能加速红细胞皱缩沉淀，助于提高对淋巴细胞分离效 果。该产品无菌液体包装，通过内毒素检测。经洗涤去除后能用于体外培养，而对细胞没有毒性，不 影响后续实验操作。 本品主要用于分离猪外周血淋巴细胞的分离。 技术参数 密度：（1.110±0.01）g/mL 渗透压：（280±15 ）mOsmol/kg 分离原理介绍 密度梯度沉降法是根据细胞密度差异，借助细胞分离液和离心，进行细胞分离纯化的常用方法之 一。细胞梯度密度分离液产生一定程度的密度梯度，将稀释后的全血铺层于分离液之上。离心后，红 细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重漂浮于分 层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到 单个核细胞。 保存条件 未开封，4-30 ℃稳定存放2 年；开封后，4-8 ℃存放2 周。避免直射光！ 使用说明 1. 取新鲜抗凝全血，EDTA （枸橼酸钠或肝素）抗凝剂均可。用等体积PBS 或 0.9% NaCl 稀释全血。 2. 在离心管中加入一定体积的分离液，将稀释后的血样平铺到分离液液面上方，保持两液面界面清 晰。分离液、抗凝未经稀释全血、PBS （或生理盐水）体积为1:1:1。 3. 室温，水平转子 700-800g （2000-2500rpm ）离心20-30min 。 4. 离心结束后，管底是红细胞，中间层是分离液，最上层是血浆/组织匀浆层，血浆层与分离液层之 间是一层薄较致密的白膜，即：单个核细胞（包括淋巴细胞和单核细胞）层。小心吸取白膜层到 另一离心管中。 5. 用 PBS/1640 稀释到一定体积，颠倒混匀。室温，水平转子 250g （1000rpm），离心 10min，弃上 清。重复洗涤 1-2 次。 6. 用 PBS 或合适的培养基将淋巴细胞重悬备用。 达科为生物工程有限公司 地址：深圳市南山区桃源街道光前工业区 20 栋 4C 邮编：518055 1 Tel:800 830 4366 / 0755Fax:0755Web: E-mail:RD@ 注意事项 1. 淋巴细胞分离液请于实验前放置至恢复室温，打开瓶盖前请颠倒混匀。 2. 稀释抗凝全血用液体【PBS/生理盐水】均为无菌液体，也可用 RPMI 1640 培养基稀释。 3. 1:1 稀释血液可降低红细胞的凝聚，提高淋巴细胞收获量。 4. 为保持淋巴细胞的活性，应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细胞层，包括淋 巴细胞和单核细胞。 5. 分离时请严格按照比例，每一份淋巴细胞分离液加两份稀释后的血液。若操作无误但离心后的界 面之间不能形成单个核细胞层，可能是血液量不足，或未使用新鲜血液，或者不适于分离该种动 物血液。 相关产品 货 号 名 称 规 格 DKW-LST-015 Human Lymphocyte Separation Tube 24 支/包 DKW-LST-050 人淋巴细胞分离管 10 支/包 DKW-LSH-0100 100mL Human Lymphocyte Separation Medium DKW-LSH-0250 250mL 人淋巴细胞分离液 DKW-LSH-0400 400mL DKW33-R0100