人脐血单个核细胞移植在心肌梗死大鼠中的促新生血管作用.pdfVIP

人脐血单个核细胞移植在心肌梗张大鼠中的僻新生血管作用 识，越来越多研究对干细胞分化为有收缩功能的心肌细胞提蹦质疑，而干细胞移 植麓促进心蔽毛纲巍管增生献雨改善心功藏去|j越来怒受裂关注。 endothelial 鹿管内皮生长因子(Vascular growthfactor，VEGF)是迄今撩定 出来的最羹爱的血管生成因子，现已发现的VEGF家族成员包括VEGF。A、 最密切的是VEGF。A。 本文主要探索黪盘单个竣缨麓猡撞蜃在大羲心照梗延髑边区健囊生盘镑作 用以及VEGF．A的表达变化，并相应地观察急性心肌梗死大鼠心功能的改变。 霹时，本磁究氇验诞了蘩盘零个棱缨蕤箨为予缓麓灏疗静一释重要缀耱来滚麓可 行性和相应优点。 研究强的： 1．礤究急缝心蕊壤死大鼠在天骑巍擎个梭绣壅移獯爱心整粳死嗣边区毛绸癜管 增生的改变。 2．研究脐血单个核细胞移穗后大鬣心脏VEGF的表达变讫教特点。 3．研究人膦血单个核细胞移植对急性心肌梗死大啜与心功能改善的作用及其应 用于急性心肌梗死的可行性。 研究材料与方法： 1． 30份脐血均来自中山大学附属籀一医院产科，经6％羟己基淀粉(贺斯)及 1．0779／1ficoll--paque分离液分离出脐血单个核细胞。cD。。阳性细胞是较 蒙媳懿纲照，熊囱多耪戏熬缨怼分诧，镪括心腿缀照积系细盎管肉皮细熬等， 移植前用流式细胞仪分析cD。。阳性细胞含量。另外，为明确移植细胞的去向， 穆{妻蘩躅BrdU标记缀熬，BrdU虿班代餐藏豫噔嚏在DNA台残麓矮取，整舍 到分裂细胞DNA中，移植后用抗BrdU免疫组化染色检测。 2． wistar雄性大鼠75只(购自中由大学动物中，办)随耩玢为：移植组惫性 心肌梗死+细胞移植)30只、对照组(惫性心肌梗死)30只和假手术组15 Ⅱ 人脐血单个核细胞移植在心肌梗死大馘中的促新生m管作用 只。攘开胸结扎前降支近段的方法建立急性心肌梗死模型，移植组梗死用边 区心虢蠹注入膀盘筚个孩细藏2×105／pL，对照缰同一部位注入等量瑶莽蓥， 假手术组开胸，穿针过线，不结扎。 3． 移檄届4周用左心导管及多导生理记录议进行心功能检测，以及用免疫缌化 方法行心薤梗死溺边区毛细盘餐：密度嚣定及BrdU阳性细藏检测：在移植菇第 4天，第7天，第14天，第28天分别对对照组和移植组取材用RT～PCR滋进 行VEGF的mRNA袭达半定量分析。对检测结粜避行统计学分辑。 结果： 1．血流动力学检测显示：与对照组相比，移植组LVEDP和HR显藩下降(PO，05)， ±dp／dt。，则明显增快(Po．05)，均提示移植组大鼠心功能得到改善。 2．免疫缀纯染色结暴露羹；移接缝鸯BrdU疆瞧缀慈存在，提示j雾}羹单令竣缫藏 在移植区存活；抗vⅢ因子免疫组化染色示梗死周边区平均血管密度(a-MVD) 明显增加，移植组为6．6±0．6个／HP，对照组为2．9±0．4个／HP，两组比较 差舅有显著蛙(p0。01。 3．对照缌和移植组大鼠心肌以表达VEGF，。和VEGF。为主，VEGF。m均呈微弱表达。 移植缎VEGF，。。和VEGF。表达于第7天明显增加，与对照组相比，差异有统计 学意义(Po。01)，并持续表达登28天。对照缀予第14天器第28天已鏊本 不表达。 对照组和移植组VEGF。的RT-PCR半定量结果(；±s) III A脐J{1l单个核细胞移植在心肌梗死丈戳中的促新生血管作用 对照组和移孝直组VEGFt*的RT—PCR半定量结果(；±s) 结论： I．人脐威单个核细胞移植于急性心肌梗死大鼠磁有脐血于纲胞存活，并且证实 了移撩组心功能较对照缓明显敬藩。飙焉可鼹旃血单个孩缁藏移植应瑟子治 疗急性心肌梗死的可行性。 2．急性心肌梗死大鼠在人脐血单个核细胞移植后毛细血管增生褥到促进，弗伴 有心功能的改善，提示毛缩盘管增生可巍楚心功能改善的黧要梳割。 3．人脐俯L单个核细胞移植后大鼠心肌梗死周边区VEGF表达增加，提示VEGF表 达上调可能是脐