菱角皮提取物中鞣酸类化合物的含量测定及其指纹图谱研究论文.docVIP

　　菱角皮提取物中鞣酸类化合物的含量测定及其指纹图谱研究论文 符少莲，周光雄，黄美燕 【摘要】 目的建立菱角皮醋酸乙酯提取物中鞣质类化合物的HPLC含量测定方法，并对提取物HPLC指纹图谱条件进行研究分析。方法采用反相C18柱（4.6 mm×200 mm，5 μm），甲醇－0.5%乙酸水溶液为流动相，梯度洗脱，柱温为25℃.freell/min，在276 nm下进行检测。结果菱角皮醋酸乙酯提取物中鞣质类化合物1,2,6-三没食子酰-β-D-葡萄糖的含量为85.7 mg/g，加样回收率为92.49%；1,2,4,6-四没食子酰-β-D-葡萄糖的含量为244 mg/g，加样回收率为96.41%；初步探讨了菱角皮提取物的指纹图谱条件。结论采用高效液相法测定菱角皮醋酸乙酯提取物中鞣质类化合物的含量，简便、快速、准确；初步得到分离菱角皮提取物各特征峰的色谱条件，为以后建立指纹图谱和制定菱角皮药材及其活性提取物的质量标准提供了依据。 【关键词】 菱； 果皮； 鞣酸； 高效液相色谱； 指纹图谱 Abstract：Objective To establish determination method of tannin pounds from bioactive ethyl acetate extract of the fruit crust of Trapa bispinosa Roxb by HPLC, and to study on analysis conditions of HPLC fingerprint of the extract. MethodsUse reverse phase C18 column（4.6 mm×200 mm，5 μm）, detection , column temperature at 25℃, flol/min, and gradient aqueous methanol solution containing 0.5% acetic acid as a mobile phase.ResultsThe determination of tannic acid pound 1, 2, 6-tri-galloyl-β- D-glucose from the extract g/g,.freelination of tannic acid pound 1, 2, 3, 6-tetra-galloyl-β-D -glucose g/g, and the average recoveries inary study on conditions of HPLC fingerprint for the bioactive extract ination method for the tannin pounds from ethyl acetate extract of the fruit crust of the plant by HPLC is simple, fast and accurate. Chromatographic conditions of ethyl acetate extract of the plant ent of the HPLC fingerprint and making quality standard of the crude drug and its bioactive extract from the plant. Key anshurica Flerov菱角的提取物确实有一定的抗肿瘤活性［3～5］。在我们的前期工作中，选取菱Trapa bispinosa Roxb的菱角皮作为研究对象，采用MTT法对菱角皮提取物抗肝癌HepG2细胞活性成分进行活性追踪，采用液－液萃取提取物各极性部位，也证实了菱角皮醋酸乙酯提取物对HepG2细胞有一定的抑制作用；采用反相C18柱层析和sephadex LH-20排阻层析分离活性成分，得到两个鞣质类化合物1, 2, 6-三没食子酰-β-D-葡萄糖（1）和1, 2, 4, 6-四没食子酰-β-D-葡萄糖（2），对该两个化合物进行了抗癌活性实验，证实其对HepG2细胞有一定的抑制作用（待发表）。此前，有研究表明存在于东北菱菱角中的没食子酸具有诱导Hela肿瘤细胞凋亡的作用［3］。两个化合物化学结构式见图1。 本研究将对菱角皮的醋酸乙酯活性部位中鞣质类化合物进行HPLC定性定量方法研究，旨在建立HPLC含量测定方法，并对菱角皮醋酸乙酯提取物HPLC指纹图谱条件进行研究分析。 1 仪器与材料 1.1 仪器Agilent Technologies 1200 Series高效液相色谱仪，电子天平（ACCULAB sartorius grou