水产微生物实验—实验器材的准备.docVIP

实验一 实验器材的准备 一、玻璃器皿的准备 微生物学实验常用的玻璃器皿，主要有试管、吸管、培养皿、三角瓶、载玻片，盖玻片等，都需要经过清洗，达到无灰尘，无油垢和无机盐等杂质后，才能保证获得正确的实验结果，有的器皿还需经包装、灭菌后方能使用。 1. 洗涤剂的种类及应用 (1) 水：水是最重要的洗涤剂，但只能洗去可溶解于水的沾污物。油、蜡等不溶于水的沾污物则必须用其他方法处理后，再用水洗。对于要求无杂质颗粒或无机盐离子的玻璃器皿，在用清水洗过后，应再用蒸馏水进行漂洗。 (2) 肥皂：肥皂是常用的很好的去污剂。有油污的器皿，通常用湿刷子涂抹一些肥皂后，刷洗器皿，再用水清洗。用5%热肥皂水去油污能力也很强。 (3) 洗衣粉：洗衣粉有很强的去污、去油能力。用1%的洗衣粉溶液洗涤玻璃器皿，特别是洗涤带油的载玻片和盖玻片，如果加热煮沸，则有很好的清洁效果。 (4) 去污粉：主要作用是摩擦去污，也有一定的去油污作用，用时先将器皿湿润，再用湿布或湿刷子沾上去污粉擦拭去污垢，然后用清水洗掉去污粉。 (5) 洗涤液：重铬酸钾(或重铬酸钠)的硫酸溶液，是一种去污能力很强的强氧化剂，常用于玻璃或搪瓷器皿上污垢或有机物的清洗，但不能用于金属器皿。配好的洗涤液可多次使用，每次用完后倒回原瓶中保存，直至溶液变为青褐色时才失去效用。使用洗涤液应尽量避免混入水分稀释。将洗涤液加热至加40℃-50℃后使用，可以加快作用速度，用洗涤液洗过的器皿，应立即用清水冲洗干净。当器皿上带有大量有机物时，应先将器皿上的有机物尽量清除后，再用洗涤液洗涤，否则洗涤液很快失效。 洗涤液具有强腐触性，溅在桌椅上，应立即用水洗并用湿布擦拭，皮肤及衣服上沾有洗涤液时，应立即用水冲洗，然后用苏打(碳酸钠)水或氨水洗去洗涤液。 (6) 浓硫酸与强碱液：器皿上如沾有煤膏、焦油及树脂类物质，可用浓硫酸或40%氢氧化钠溶液浸洗，处理所需时间随所沾物质的性质而定，一般只需5-10min，有的需数小时。 (7) 有机溶剂：有时洗涤浓重的油脂物质及其他不溶于水也不溶于酸或碱的物质，需要用特定的有机溶剂。常用有机溶剂有汽油、丙酮、酒精、苯、油镜洗液及松节油等可根据具体情况选用。 2. 常用玻璃器皿的洗涤方法 (1) 新玻璃器皿的洗涤：新购置的玻璃器皿含有游离碱，应用2%盐酸溶液浸泡数小时后，再用水冲洗干净。 (2) 用过的玻璃器皿的洗涤：盛过培养基的玻璃器皿，应先将培养物倒入或刮入废物缸中，另行处理。如对人、畜、植物有致病作用的培养物需经煮沸灭菌后再倒去及洗涤。如果器皿内的培养基已经干涸，可将器皿放在水中浸泡数小时或煮沸，将干涸物倒出后再行洗涤。洗涤时可用试管刷或瓶刷，粘取去污粉擦去洗不脱的污垢，或用洗衣粉或肥皂擦洗油脂，最后再用流动的清水清洗干净。当器皿内壁的水均匀扩展成一薄层而不现水珠时，即为洗涤干净，否则应重洗或用洗涤液来洗涤。经这样洗涤过的器皿，可用来盛培养基和无菌水等。如盛化学药剂(试剂)或用于较精确的实验，则在用自来水冲洗之后，还要用蒸馏水淋洗3-4次，烘干备用。 (3) 吸管的洗涤：吸取过一般液体的吸管，用后浸没在盛有清水的容器内，切勿使管内物干燥以免增加洗涤的麻烦。吸过菌液的吸管，应先浸入5%石炭酸溶液内，经5min以上灭菌后，再浸入清水中；吸过有油脂液体的吸管，应先浸入10%氢氧化钠溶液中，浸1h以上，再进行清洗，如仍有油脂，则需浸入洗涤液内，浸泡1h以后再洗涤。无菌操作所用过的吸管，应先用钢针将棉塞取出后再洗涤。吸管洗涤后可倒立于垫有干净纱布的容器中，待水滤干后再用，如急用可放电烤箱内60-70℃烤干备用。 (4)载玻片及盖玻片的洗涤：新载玻片和盖玻片，应先在2%的盐酸溶液中浸泡1h，后用自来水冲洗，再用蒸馏水洗2-3次，也可用1%的洗衣粉液洗涤。用洗衣粉洗涤时应先将洗衣粉液煮沸，后将载片散开放入煮沸液中，持续煮沸10-15min(勿使玻片露出液面以防钙化变质)。冷却后用自来水冲洗，再用蒸馏水换洗2-3次。如用洗衣粉液洗涤新盖玻片时则只能在煮沸的洗衣粉中保持1min，待泡沫平下后再煮沸1min，如此反复2-3次(煮沸时间过长，会使盖片钙化，易碎)，冷却后再用自来水冲洗，蒸馏水换洗。 用过的载玻片，洗涤方法同上，但应先擦去表面油垢后再用洗衣粉液煮，煮沸的时间以30rnin为好，其余处理同上法。洗涤后的载、盖玻片，可以烘干或晒干后放在干净的容器内或用干净纱布包好备用。 3. 玻璃器皿的包装灭菌 在微生物学工作中需要无菌的玻璃器皿。如无菌吸管，无菌培养皿等，这些玻璃器皿在灭菌之前需要进行隔离包装，常用的包装方法有： (1) 培养皿的包装: 洗净干燥后的培养皿，可放在特制的金属容器中灭菌，或可按6-10套培养皿为一组，用旧报纸卷起来，将两端封严，再进行灭菌。 (2)