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羽肠粉制取氨基酸的研究 摘要：在100℃、6mol/L 的硫酸作用下, 含硬质粗蛋白很高的羽肠粉经10H 水解可制得氨基酸态氮含量为5. 2m g/mL的氨基酸。其水解液中的酸可用氧化钙中和至微酸性 (pH = 2～4)。过滤后的滤液经稀释做为农作物叶面喷施的有机液体肥, 而剩余的滤渣亦可做缺硫土壤用的固体肥料。 氨基酸是动植物重要的营养物质,也是蛋白质的基本结构单位,可广泛应用于营养品、配合饲料、复合肥料等。1：随着大型养鸡场的建立,每年有大量鸡毛被扔掉。鸡毛中粗蛋白质含量高达 80% 以上2：将鸡毛进行高压蒸汽蒸煮可得含丰富蛋白质的羽肠粉。羽肠粉用 酸水解可制取氨基酸。 水解液中的酸需经中和处理使之呈微酸性, 再经稀释可喷施在农作物叶面上, 增产10%～50%,并可以保持农业生态平衡。 用羽肠粉制取氨基酸的工艺简单，成本低,具有明显的经济效益及环境效益。 1 试验部分 1. 1 主要仪器及试剂 仪器：701-2 型电热干燥箱, PHS-2C型精密酸度计, HH.S21-4型电热恒温水浴锅,722型光栅分光度计,日立835- 50型氨基酸自动分析仪。 水合茚三酮: 0.6g 茚三酮加入15mL正丙醇, 30mL正丁醇, 60mL乙二醇及9mLpH 5. 4的乙酸-乙酸钠缓冲液, 混匀备用。 试剂：乙酸-乙酸钠缓冲液(pH= 5.4) : 54.4g乙酸钠加50mL无氨蒸馏水,30mL 冰乙酸,用无氨蒸馏水稀释至100mL. 标准氨基酸:用 10% 异丙醇溶46. 8m g 亮氨酸, 并定容至100mL.取此液 5mL ,用蒸馏水稀释至50mL.即每毫升含氨基酸态氮5?g的标准液。 抗坏血酸、盐酸、硫酸、醋酸、乙醇、 氢氧化钠、氧化钙均为化学纯, 试验用水为无氨去离子水。 原料：羽肠粉:黑龙江省新华农场生产。 1. 2 氨基酸的分析 氨基酸的游离氨基与水合茚三酮作用后, 能产生二酮茚-二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物。化合物。在波长570nm下,用 1cm 比色皿测其吸光度,绘制标准曲线.根据标准曲线计算出未知样品中氨基酸的总量。 1. 3 氨基酸的制备 称取若干份一定量的羽肠粉,分别置于锥形瓶中,并加入不同浓度的盐酸、 硫酸、 醋酸各 150mL. 加瓶盖后置于烘箱中,控制温度加热使其水解生成氨基酸, 在不同时间取上清液 5mL 于比色管中, 编号待测其氨基酸含量。移取 0. 40mL 待测液于 100mL 容量瓶中,加无氨蒸馏水稀释至刻度线。以下步骤同氨基酸的分析, 测其氨基酸含量。 2 结果与讨论 2. 1 酸的浓度对氨基酸含量的影响 选择不同浓度的盐酸,硫酸和醋酸作为羽肠粉制取氨基酸的水解液绘制不同酸的浓度与水解液中氨基酸含量的关系曲线,如图(1～3)。 图1氨基酸态氮含量随盐酸浓度变化曲线 图 2 氨基酸态氮含量随硫酸浓度变化曲线 从图3 中明显可以看出, 醋酸水解液中氨基酸态氮的含量极低,且随着酸 度的变化氨基酸态氮的含量几乎不变化,因此用醋酸作为水解液不理想。又从图 1 比较各条曲线可知,当盐酸浓度为6～8mo l?L时,相对应各水解时间上氨酸态氮的含量最高, 其它氨基酸态氮的含量均较低同样可从图 2中得知在5～6mo l?硫酸水解液中氨基酸态氮的含量较高,但不如6～8mo l?L盐酸的高。可是高浓度的盐酸蒸汽对反应器的腐蚀严重,污染空气。且水解液中存在大量氯离子, 不易除去,作为液体有机复合肥使用时使土壤盐碱化所以选5～6mol?L 的硫酸来做水解液较为适宜。 图 3 氨基酸态氮含量随醋酸浓度变化曲线 2. 2 水解时间对氨基酸含量的影响 从图 1～3 中可以看出,随着水解时间的延长水解液中氨基酸的含量也随之增加。但 是醋酸水解液中氨基酸态氮的含量增加甚微,而盐酸与硫酸的水解液中氨基酸态氮的含量随时间增加而明显地增多。在水解时间为10h时, 其氨基酸态氮的含量为最高。继续延长水解时间至16h时, 实验结果说明所测得的氨基酸态氮的含量与10h相比增加不大。故从生产周期考虑,选择水解时间为10h比较理想。 2. 3 水解温度对氨基酸含量的影响 称取5份羽肠粉各10g于锥形瓶中,再加入6mol?L硫酸 150mL分别置于 55℃, 80℃, 90℃, 100℃, 105℃恒温水解。并在水解5h\10h时取上清液,分别测其中氨基酸态氮的含量,制作氨基酸 态氮的含量随水解温度变化曲线 (如图 4)。 图4 氨基酸态氮含量随温度变化曲线 比较图 4中的两条曲线,水解 10h的水解液中的氨基酸态氮的含量远高于水解 5h的含量在水解 10h 时, 100℃与105℃的氨基酸态氮的含量相差较小;低于 100℃时, 水解效果均不如100℃的,所以水解温度选择为100℃。 2.