炎症因子与胶原诱导关节炎大鼠糖调节受损的相关性研究.pdfVIP

摘要 摘 要 背景及目的： 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种系统性自身免疫性炎性疾病， 可导致多系统受累，包括内分泌系统疾病。近期研究发现 RA 患者代谢综合征 （metabolic syndrome ，MetS ）的发病率有明显升高，且与血沉、疾病活动度 (DAS28 评分) 、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor ，TNF ）-α、白介素（interleukin， IL ）-1、IL-6 正相关，故而认为RA 患者MetS 的发生与炎症存在某种联系，而 血糖升高、胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)、脂质代谢紊乱均为MetS 的一部 分。同时亦有研究发现RA 患者的胰岛β细胞功能出现了一定程度的损害。RA 患者的糖代谢受到了不同程度的损伤，且糖代谢受损可额外加快RA 患者动脉粥 样硬化及其他关节外病变的进展，在一定程度上增加了RA 患者的经济负担及死 亡率，故而RA 并发糖代谢异常值得我们关注。然而RA 并发糖代谢异常、及导 致的糖尿病发病显著升高的机制是什么却未见有明确的报道。 为了探讨 RA 并发糖代谢异常的可能机制，本实验观察了胶原诱导关节炎 （collagen induced arthritis，CIA ）大鼠空腹血糖及胰岛素水平、胰腺β细胞凋亡 蛋白织天冬氨酸蛋白水解酶 （caspase）-3 的表达，同时分析了这些改变与炎症 因子TNF-α、IL-6 的相关性，试图阐述CIA 大鼠糖代谢异常的可能机制。 方法： 1、建立CIA 大鼠模型：采用牛Ⅱ型胶原建立模型，通过关节炎症评分将大 鼠分为模型组与对照组，应用踝关节HE 染色进一步确认成功建立模型。 2 、检测空腹血糖及胰岛素：于初次免疫后17 天禁食14 小时，眼内眦静脉 层取得血标本，采用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖水平，应用ELISA 法检测空 腹胰岛素水平，使用SPSS20.0 分析两组间空腹血糖及胰岛素的差异。 3、检测胰岛凋亡蛋白caspase-3 的表达：于初次免疫17 天后，应用免疫组 织化学法检测胰岛caspase-3 的表达，并使用SPSS20.0 分析两组间的表达差异。 4 、检测血清TNF-α、IL-6 的水平：与初次免疫后 17 天，眼内眦静脉层取 得血标本，应用ELISA 法检测各组大鼠血清TNF-α、IL-6 的浓度，并使用SPSS20.0 分析TNF-α、IL-6 与空腹血糖及胰岛素的相关性。 II 万方数据 摘要 结果： 实验第 12-14 天成功建立 CIA 模型，第 17 天时模型组空腹血糖水平为 （6.22±0.94 ）mmol/L 高于对照组（5.01±0.73 ）mmol/L （P ＜0.05) ；模型组空腹 胰岛素水平为 （9.38±0.4 ）ng/ml 低于对照组 （14.76±2.48）ng/ml （P ＜0.05 ）；模 型组IL-6 水平为 （503.49±104.04 ）pg/ml 高于对照组的 （343.02±75.73)pg/ml （P ＜0.05 ）；模型组TNF-α 水平为（748.14±96.44 ）pg/ml 高于对照组的（222.44±25.17 ） pg/ml （P ＜0.05 ）；模型组胰腺组织胰岛caspase-3 的表达明显高于对照组。相关 性分析结果显示，血清TNF-α 及IL-6 水平与空腹血糖、胰岛素浓度明显相关（均 P ＜0.05 ）