内质网应激相关的蛋白激酶R样内质网激酶-转录活化因子4-CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白通路参与支气管肺发育不良大鼠肺细胞凋亡.pdfVIP

中华实用儿科临床杂志2015 年2 月第30 卷第4 期 Chin J Appl Clin Pediatr ,February 2015 ,Vol. 30 ,No. 4 .305. ·实验研究· 内质网应激相关的蛋白激酶 R 样内质网激酶-转 录活化因子4-CCAAT/增强子结合蛋白同源、蛋白 通路参与支气管肺发育不良大鼠肺细胞凋亡 卢红艳张婷王秋霞唐炜 [摘要] 目的 探讨内质网应激( ERS) 相关的蛋白激酶 R 样内质网激酶(PERK )-转录活化因子 4 (ATF4) -CCAAT/增强子结合蛋白同源、蛋白( CHOP) 通路在支气管肺发育不良( BPO) 大鼠肺细胞凋亡中的作 用。方法 将48 只新生早产 SO 大鼠按随机数字表法分为 BPO 组和对照组。 BPO 组持续暴露于体积分数为 850 mUL 的高体积分数年~(高氧)中，对照组置于空气中。在7 d 、 14 d 和 21 d 取肺组织，采用 ONA 断裂的原位 末端标记法(TUNEL) 检测肺细胞凋亡，实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR) 检测葡萄糖调节蛋白 78 (GRP7 8 )、 PERK 、 ATF4 和 CHOP mRNA 表达，Western blot 技术检测 GRP78 、磷酸化 PERK( pho-PERK) 、 ATF4 和 CHOP 蛋白表达。结果 随高氧暴露时间延长，BPO 组大鼠肺细胞凋亡指数(AI)逐渐增加，与同时间点对照组 比较差异均有统计学意义(7 d : 15. 50 :t 0. 58 比1. 25 :t O. 50 , 14 d: 27. -:5 :t 1. 71 比 3.25 :t 0. 饵，21 d :50.50 :t 3.70 比 4.00 :t 1. 15;1 =57. ∞、20.58 、 25.16 ， P 均 0.01) ;GRP78 、 PERK 、 ATF4 和 CHOP mRNA 表达较同时间 点对照组明显 t升[GR凹8:7 d (33.88 :t 3. 73 )比( 11. 65 :t 1. 00) , 14 d (54. 50 :t 2. 18) 比( 12.84 :t 1. 41) ,21 d (95. 34 :t 7. 61 )比( 12. 43 :t 0.59) ; PERK: 7 d (5.23 :t 0.92) 比(1. 45 :t 0.46) , 14 d (7.60 :t 1. 56) 比(2.18 :t 0.97) ,21 d (1 6.55 :t 0.50) 比(2.90 :t 1. 18) ;ATF4:7 d (23.04 :t 2.45) 比( 12. 56 :t 2. 81 ) , 14 d (28. 66 :t 2. 66 ) 比( 15. 18 :t 2. 92) ,21 d (36. 63 :t 2. 99 )比 (15.14 :t 2.09) ;CHOP:7 d (2.21 :t 0. 19) 比 (0.81 :t 0. 02) , 14 d (4.19 :t 0.17) 比(0.90 :t 0.08) ,21 d (6.08 :t 0.38) 比(0.88 :t 0. IO);P 均 0.05];GR凹8 、 pho-PERK 、 ATF4 和 CHOP 蛋白表达较对p.ftm 亦明屉增高[ GR P7 8 : 7 d ( 1. 33 :t O. 03 )比 (0.85 :t 0. 04) , 14 d (1. 31 :t 0. 02) 比 (0.92 :t O.Ol) ,21 d (1. 82 :t 0.28) 比(0. 87 :t O. 01 ) ; pho-PERK: 7 d (0. 68 :t O. 02 )比 (0. 54 :t O. 01 ) , 14 d (1. 04 :t O.Ol) 比( O. 65 :t O. 01 ) , 21 d ( 1. 29 :t O. 02 )比( O. 73 :t O. 01 ) ; ATF4 : 7 d ( 1. 26 :t O.