卤代荧光素荧光猝灭法测定肾上腺色腙.pdfVIP

Vo l. 33 No.4 高等学校化学学报 2012 年4 月 CHEM1CAL JOURNAL OF CH1NESE UNIVERSITIES 683 … 688 卤代荧光素荧光猝灭法测定肾上腺色踪 甘晓娟，刘绍瑛，刘忠芳，胡小莉 (发觉与实时分析教育部重点实验室，西南大学化学化工学院，重庆 400715 ) 摘要 在 pH=6.6 的缓冲介质中，肾上腺色踪(CBZC) 与二氯荧光素(DCF) 、二澳荧光素(DBF) 和二腆荧光 素(OTF) 通过静电引力、芳基堆积作用和范德华力形成摩尔比为2: 1 的复合物，引起上述二卤代荧光素的荧 光发生猝灭，最大猝反波长分别位于533 ， 536 和560 nm 其荧光猝火值(ilF) 在一定范围内与肾上腺包踪浓 度成正比，荧光猝火反应具有较高的灵敏度，对 CBZC 的检出限分别为 3.3 nglmL( CBZC-DCF 体系) , 5.7 nglmL( CBZC-DBF 体系)和 129. 6 nglmL( CBZC-DIF 体系) .考察了共存物质的影响、荧光猝灭反应的适宜条 件和影响因素，结果表明，该方法具有良好的选择性，可用于 CBZC 的血药和尿药浓度的快速检测.从温度 的影响、荧光寿命以及 Stern-Volmer 图判断该反应为静态猝灭反应 关键词 二氯荧光素;二澳荧光素;二腆荧光素; 肾上腺色踪;荧光猝灭 中图分类号 0657 文献析、识码 A DOI: 10. 3969/j. issn. 0251 .0790. 2012. 04. 008 肾上腺色踪(Carbazochromum , CBZC) 化学名为3-理基-1- 甲基-5 ， 6-n -2-缩氨服，能够促 引睐满二酣 进毛细血管收缩，降低通透性，增进断裂毛细血管断端的回缩作用，是临床常用的促凝血药，主要用 于脑、肺、肾、肠毛细管损伤出血及血小板减少症「1l ，还可用于战地创伤的快速止血，有助于提高伤者 的存活率l2J 目前，肾伫腺色踪尚未被中国药典收录，对它的测定和临床安全性及有效性研究与评价 的文献较少，己报道的测定肾上腺色脏的少数几种方法主要有溶出皮测定法[3] 、化学发光法[4 ， 5] 和高 效液相色谱法[6 -8] 其中，辞出度测定法和高效液相色谱法操作较为复杂耗时;化学发光法[4J 的检州 限为27 nglmL ，灵敏度不够高因此，需要进 J步研究和发展测定 CBZC 的新方法荧光分析法选择 性好，灵敏度高，操作简单、快速，因而被广泛应用于药物分析领域. 本研究发现，在弱酸性条件下，二卤代荧光素[二氯荧光素(DCF) 、二澳荧光素(DBF) 和二腆荧 光宗(DIF) ]与肾上腺色晾反应生成 1: 2 的基态复合物，导致二卤代荧光素的荧光猝灭，在一定范围 内，肾上腺色踪浓度和荧光猝灭值(ð.F) 成正比，对于CBZC 的检出限分别为3.3 ng/mL( CBZC-DCF 体 系) , 5.7 nglmL( CBZC-DBF 体系)和 129.6 nglmL( CBZC-DIF 体系) .对荧光猝灭反应的适宜条件、影 响因素和共存物质的影响进行了研究.从温度对猝灭反应的影响、双分子猝火常数Kq和荧光寿命的测 定可以判断本反应属于静态猝灭反应.利用这一荧光猝灭反应建立了高灵敏、简便、快速测应 CBZC 的新方法. 1 实验部分 1. 1 仪器与试荆 FL-TCSPC 型 Fluorolog-3 荧光光谱仪(法国 Horiba Jobin Yvon lnc. 公司); R 立 F-2500 型荧光分光 光度计(日本岛津公司) ; pH SJ-3F 型酸度计(上海精密科学仪器有限公司) ; K-Q250B 型超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司) . CBZC( 郑州玲锐制药有限公司)溶液:先配制40. 0μglmL 的储备溶液，再用水稀释重 5.0μ吕/mL 作为工作溶液; DCF 和 DBF( 北京化工厂)溶液:先配制成3.