高效液相色谱法测定沙苑子及其炮制品中沙苑子苷的含量论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定沙苑子及其炮制品中沙苑子苷的含量论文 .freelm×250 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(21∶79)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长为266 nm。结果 沙苑子苷在0.041 6～0.665 6 μg范围内线性关系良好(r＝0.999 9),平均加样回收率为100.6%,RSD＝0.73%。结论 本法简便、准确、重复性好、专属性强,.freelethod for the determination of planatuside in Semen Astragali planati, and study the content change of planatuside processed. Method HPLC n (4.6 mm×250 mm, 5 μm), acetonitrile-0.1%phosphoric acid (21∶79) as mobile phase, the floL/min, and detected . Result planatuside shoethod is simple, accurate, reproducibility and strong specificity. It can be used for the quality control of Semen Astragali planati. Processing en Astragali planati. Key en Astragali planati；planatuside；HPLC；content determination 沙苑子为豆科植物扁茎黄芪Astragalus planatus R.Br.的干燥成熟种子,主要分布于陕西、内蒙。味甘、性温,归肝、肾经,具有温补肝肾、固精、缩尿、明目等功效,用于肾虚腰痛、遗精早泄、白浊带下、小便余沥、眩晕目昏等病症1。近年来对其生药鉴别、药理活性及化学成分研究均有报道2。《中华人民共和国药典》2005年版收载沙苑子炮制方法为净制法(即除去杂质,洗净,干燥)、盐炙法(照每100 kg净药材用食盐2 kg的比例,将食盐用适量水溶解后,滤过,备用。取净沙苑子,用盐水拌匀。闷透,置锅内,以文火加热,炒干。炒至表面鼓起,色泽加深,呈深褐绿色或深灰褐色,取出,放凉即可)。 国内相继有对沙苑子中沙苑子苷含量测定的报道3-4。但是,有关沙苑子炮制前后指标成分的含量变化研究尚未见报道。笔者收集了10批样品,采用高效液相色谱(HPLC)法测定沙苑子苷的含量,并进行了炮制前后沙苑子苷含量比较,为制定沙苑子的质量标准提供了方法和依据。 1 仪器与试药 Agilent 1200 series高效液相色谱仪。乙腈为色谱纯,乙醇、磷酸为分析纯,水为超纯水(自制)。 沙苑子药材样品10批,由中国药品生物制品检定所标本馆馆长张继老师鉴定,均为豆科植物扁茎黄芪Astragalus planatus R.Br.的干燥成熟种子。沙苑子苷对照品为自制,由沙苑子药材中分离,经理化性质及波谱数据(UV、1H-NMR、13C-NMR、MS)鉴定为鼠李柠檬素3,4’-O-β-D-双葡萄糖苷,并用HPLC面积归一化法测定,其纯度为98.63%。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 Apollo-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(21∶79)；流速1.0 mL/min；检测波长为266 nm；柱温25 ℃。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取沙苑子苷对照品适量,加60%乙醇制成每1 mL含15 μg的沙苑子苷,即得。 2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末(过3号筛)约0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入60%乙醇25 mL,称定重量,加热回流1 h,放冷,再称定重量,用60%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。 2.4 系统适用性试验 依上述色谱条件,分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,测定(色谱图见图1)。理论塔板数按沙苑子苷峰计算应不低于4 000。 通过Agilent 1200二极管阵列检测器(DAD)检测样品,对样品中沙苑子苷峰进行了单一性验证(峰纯度检查),其光谱重叠程度好,纯度因子(purity factor)为999.432,大于设定的阈值(Threshold)990,表明样品中沙苑子苷峰纯度较好。 2.5 线性关系考察 精密称取沙苑子苷5.20 mg,置于50 mL量瓶中,加60%乙醇溶解并定容,制成标准品储备液。分别精密量取此标准储备液0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mL至10 mL量