定量检测抗环瓜氨酸肽抗体在类风湿性关节炎诊断中的应用.pdfVIP

· 92· 医药论坛杂志．200卫生 旦 箜 鲞 箜垫 · 医学检验· 定量检测抗环瓜氨酸肽抗体在 类风湿性关节炎诊断中的应用 刘 磊 河南省中医院检验科 郑少I1市 450002 摘要 目的 对疑似类风湿性关节炎的患者，进行环瓜氨酸肽抗体定量检测，以探讨抗环瓜氨酸肽(CCP) 抗体在类风湿性关节炎(RA)中的诊断意义。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测抗CCP抗体相对浓 度，采用免疫散射比浊发定量检测类风湿因子(RF)浓度，并对各自的阳性率进行统计学分析。结果 抗CCP抗体 在RA诊断中敏感性较RF低，特异性较RF高，有显著差异(尸0．O1)，抗CCP抗体与RF联合检测能使对RA的 诊断的敏感性和特异性部有所提高 结论 抗CCP抗体是一种新的对RA有较高诊断价值的血清学标记物，抗 CCP抗体的定量检测有助于了解RA的患病情况，并且抗CCP抗体与RF的联合检测更有利于RA的诊断。 关键词 关节炎；类风湿；抗CCP抗体；类风湿因子 中图分类号：R593．22 文献标识码：B 文章编号：1672-3422(2007)23-0092-02 类风湿性关节炎(RA)是一类以关节滑膜炎 订的RA分类诊断标准。 为特征的慢性全身性自身免疫性疾病，滑膜炎持 1．2 研究方法 抗CCP抗体采用ELISA法，体外 久反复发作导致关节内软骨和骨质破坏，关节功 定量检测抗CCP抗体．采用德国欧蒙公司试剂，标 能障碍，终致残疾¨ 。。迄今为止，临床实验室检 准曲线利用Excel的拟合曲线，严格按说明书进行 测类风湿性疾病最常见和较成熟的方法是检查血 操作，测定值5RU／ml为阳性。RF测定采用速 清中类风湿因子(RF)和抗链球菌溶血素“0” 率散射比浊法，采用德国德赛公司试剂，测定值 (ASO)。但二者的特异性和敏感性均受某些抗 20IU／ml为阳性。 原，抗体物质的干扰而出现假阳性和假阴性，并不 2 结果 能成为理想的实验室指标 。近年来，国外相继 报道了抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、 2．1 定量检测CCP 用酶标仪读数，取波长 抗聚角蛋白抗体(AFA)对RA有较高特异性的诊 450nm，先用空白孔校零，然后读取各孔OD值，测 断指标，并且可用于RA的早期诊断 -6]。1998年 得标准品得出如下数据：浓度为 1、5、20、100、 荷兰学者Schellekens将APF、AKA、AFA的共同抗 200RU／ml的吸光度分别为0．034、0．49、1．05、 原决定簇的具有l9个氨基酸残基的线性肽链经过 1．72、2．01。 转化形成环瓜氨酸肽(CCP)，2000年，Schellekens 2．2 浓度与吸光度的对应关系 利用Excel将对 又根据聚角蛋白微丝蛋白(filaggrin)的cDNA序列 应数据输入可得浓度与吸光度的对应关系，见图1。 合成由21个氨基酸残基组成的环瓜氨酸肽，并用 250 其作为抗原采用ELISA法检测血清中的抗CCP抗 体，并且有很高的敏感性和特异性分别为68％和 200 96％。我们检测了186例疑似患者血清中的抗 15O ◆系列l CCP抗体和RF，以了解用 EfJISA法定量检测抗 100 — — 指数(系列1) CCP抗体的方法及抗CCP抗体与RF两者联合检 测的意义。