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RNA沉默的定义 RNA沉默是指由双链RNA（dsRNA）诱发的同源mRNA高效特异性降解的现象。 生物学现象来定义： 生物技术来定义： 人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA,从而诱导内源靶基因的mRNA 降解,达到阻止基因表达的目的。 RNA沉默是指由双链RNA（dsRNA）诱发的同源mRNA高效特异性降解的现象。 生物学现象来定义： 生物技术来定义： 人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA,从而诱导内源靶基因的mRNA 降解,达到阻止基因表达的目的。 RNA沉默是指由双链RNA（dsRNA）诱发的同源mRNA高效特异性降解的现象。 生物学现象来定义： 生物技术来定义： 人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA,从而诱导内源靶基因的mRNA 降解,达到阻止基因表达的目的。 1998年Fire等证实，将制备的RNA高度纯化后发现，单链RNA的基因抑制作用很微弱，而用纯化后的dsRNA却能高效、特异地阻断相应基因的表达。实验证明双链RNA抑制基因的表达的效率比纯化后的反义RNA至少高几个数量 ，他们称此现象为dsRNA介导的RNA干扰（RNAi） Negative control uninjected Antisence RNA dsRNA dsRNA inject 图2. 原位杂交法检测不同RNA导入后线虫Mex-3基因产物的表达 dsRNA inject dsRNA inject dsRNA inject dsRNA RNA沉默的作用机制 dsRNA在Dicer酶的作用下，被切割加工成21-25nt的双链siRNA 激活的RISC将siRNA的双链解开，并通过碱基互补配对识别互补的mRNA，然后切割靶mRNA。 siRNA 结合一个酶复合物形成RISC RNA沉默抑制子的作用机理 抑制病毒siRNA的产生 阻碍siRNA整合入 RISC 干扰RISC降解同源的mRNA 主要的三种作用方式 A B C D A. GFP在烟草中大量表达；B.携带嵌入GFP的双向质粒的农杆菌诱导的GFP基因沉默；C. PVY感染GFP发生沉默的烟草；D. 带有PVY HC-Pro基因的PVX病毒载体感染GFP发生沉默的烟草。紫外灯下观察GFP为绿色荧光 * * Quality Life: Live better ― longer 什么时候都不要忘记 好好学习喔！ Thank You！