香蕉内生细菌分离、活性评价及数量分布.pdfVIP

第28卷 第4期 热 带 作 物 学 报 Vo】．28 No．4 2007年12月 CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS Dec．20o7 香蕉内生细菌分离、活性评价及数量分布 付业勤 蔡吉苗 刘先宝 黄贵修’ 海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室喜宝莹 喾 主 譬 耋 翼篓瑟 海南儋州57·737 摘 要从香蕉健康植株的根、假茎、叶柄、叶片等组织中分离获得386份内生细菌分离物。通过体外活性评价 筛选出对9种常见的植物病原真菌具有一定抗性的内生细菌分离物28份，占总分离物的7．25％，其中对香 蕉枯萎病菌抑制率达到8O％～100％的分离物有9份。初步测定结果表明，这些分离物的基础生物学特性的分 类地位初步归属为不动杆菌属(Acinetobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)、短杆菌属(Brevibacterium)、产碱杆菌属 (Alcaligefte8)和伯克霍尔德菌属(Burkholderia)细菌。9份分离物与病原真菌菌丝体对峙培养镜检结果表明，供 试的9种病原真菌菌丝体均出现不同程度的肿胀与断裂。内生细菌在香蕉植株体内的数量分布分析发现，内 生细菌在根、假茎、叶柄、叶片等组织中的数量分布呈递减趋势。 关键词 香蕉 内生细菌 活性评价 数量分布 中图分类号 $668．1 $432．4+2 植物内生细菌是指一生或至少一生中的某一阶段能进入活体植物组织内，且它们的存在并未使植 物组织的表型特征和功能有明显改变的细菌【”。这些内生细菌不仅将植物组织作为其栖息场所，且往往 对寄主植物起到促生、防病虫、固氮等多方面的作用；有的还是良好的外源基因载体【 。近年来，利用内 生细菌进行植物病害的生物防治已经成为人们研究的热点。植物内生细菌生防机制主要有产生抗生 素、竞争生态位和营养、诱导寄主产生系统抗性、灭活病菌萌发因子、产生胞外酶溶解病原菌细胞壁和 降解毒素等几种方式【 。利用土壤、植物根际等植物外部环境中的拮抗细菌防治植物病害已有一些研究 报道，但由于土壤环境的复杂性，这些生防菌易受外界环境条件的影响，不易在病原物存在的环镜中稳 定繁殖，从而严重影响其防病效果【 】。而内生细菌对化学农药难以发挥作用的植物土传病害、维管束病 害和系统性病害的防治具有其独特的优势【 】，但是，利用内生细菌防治香蕉主要病害的研究尚未见报 道。本研究通过对香蕉内生细菌的分离、活性评价及数量分布分析，获得28份对香蕉主要病原菌表现 出一定抗性的拮抗内生细菌分离物，并对其中的9份分离物进行了基础生物学特性测定，为拮抗内生 细菌菌株的进一步研究、弄清其防病机理与应用奠定基础。 1 材料与方法 1．1 材 料 1-1．1 分离、培养用培养基 NA培养基：牛肉浸膏0．3％，酵母浸膏0．1％，蛋白胨0．5％，葡萄糖 1．0％，琼脂1．5％，蒸馏水l 000 mL，pH 7．0。PDA培养基：马铃薯200．0 g，葡萄糖20．0 g，琼脂15．0 g， 蒸馏水 l 000 mL。改良培养基：牛肉浸膏0．3％，香蕉组织汁液100 mL，蛋白胨1．0％，琼脂1．5％，蒸馏 水 l 000 mL，pH 7．0。 1．1．2 供试菌株 香蕉炭疽病菌 [Colletotrichum toilette(Berk．Curt．)Arx．】、香蕉褐缘灰斑病菌( ～ cosphaerella musicola)、香蕉黑星病菌 (Macrophoma muscle)、香蕉枯萎病菌 [Fusarium oxysporum f sp． cubense(E．F．Simth)Snyder et Hansen】、芒果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporkddes)、杂交竹枯萎病菌 『Fusarium oxysporum f sp．cubense(E．F．Simth)Snyder et Hansen】、橡胶树炭疽病菌(Colletotrichum gloeospo- 聂 丽 芰撵计蜘项目(No．2007BAD48B05)、中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(No．2007b．zsl J003)、海南省教育厅高 等学校科研资助重点项目(No．Hj~200321)、中国热带农业科学院科技基金项目(No．RKY0704)资助