驱虫斑鸠菊对体内外黑色素细胞中黑色素小体作用的电镜观察.pdfVIP

中国民族医药杂志 2OO7年6月第6期 驱虫斑鸠菊对体内外黑色素细胞中 黑色素小体作用的电镜观察 新疆自治区临床药学研究所(鸟鲁木齐830001) 李红健 中国药科大学新药筛选中心(南京210038) 尚 靖 新疆自治区药物研究所(鸟鲁木齐830002) 徐建国 摘 要：目的：研究驱虫斑鸠菊在体内、外对黑色素细胞中黑色素小体的影响，来探讨驱虫斑鸠菊治疗白癜风的机理。方 法：用电镜观察体外对培养的黑色素细胞及体内对棕色豚鼠皮肤内黑色素小体的影响。结果：在体外能提高黑色素细胞中 黑色素小体Ⅲ，Ⅳ型的比例，阳性对照组亦有不同程度的作用；在体内可增加棕色豚鼠皮肤内黑色素小体的数量比空白时 照组明显，但与阳性对照组相比变化不明显。结论：驱虫斑鸠在体内、外可促进黑色小体向成熟化发展，这可能是驱虫斑鸠 菊治疗白癜风的分子机制。 关键词：驱虫斑鸠菊；黑色素细胞；黑色素小体；电镜 中图分类号：R291，5 文献标识码：A 文章编号：1006—6810{2007)06一OO46—02 驱虫斑鸠菊(Vemonia Anthelmintica Willd)是一种菊科植 0．25％胰酶中4℃过夜消化16—24h，然后用小镊子轻轻将 物，具有利湿消肿，驱虫镇痛的作用…，收载于《中华人民共 表皮与真皮分离，将表皮组织置于0．25％胰酶中37 消化 和国卫生部药品标准一维吾尔药分册》，维吾尔语称“卡力 10rain，用血清终止消化，用剪刀剪碎表皮组织，轻轻吹打 孜然”，药用部位为成熟瘦果。在维吾尔医学中常用来治疗 5min，筛网过滤后吸取细胞悬液于离心管中，1000r／min，弃 白癜风。我所把驱虫斑鸠菊制成注射液治疗白癜风，取得 上清加入黑色素培养液(基础培养基未DMEM／F12，含10％ 了较好的疗效。本实验通过观察驱虫斑鸠菊在体外对培养 小牛血清，bFGF10ng／ml，CTlOng／ml，氢化考的松0．5 InI 的黑色素细胞及体内对棕色豚鼠皮肤内黑色素小体的影 等)；吹打细胞悬液，细胞计数，按2—4X 10s／ml密度接种于 响，来初步探讨驱虫斑鸠菊治疗白癜风的机理。 培养瓶中，于37~C5％CO2培养箱中进行培养。②将培养的 1 材料和方法 黑色素细胞传三代于6孔培养板，接种浓度为1 X l ，InI， 1．1材料：驱虫斑鸠菊注射液(新疆自治区临床药学研究 24h后加入不同浓度的药物，以培养液作空白对照，48 ． 所提供，批号：010608)；制斑素(补骨脂)注射液(河南医科 25％胰酶消化6—8分钟获得细胞悬液，用0．1M PBS洗两 大学制药厂，批号：000405)，八甲氧补骨脂(8一MOP，德国)； 次，以lO00rpm离心5min，细胞团加入2．5％戊二醛固定，处 mMX(Sis~rm)；DMEM培养基(Gibco)；F12培养基(Gibco)；霍 理后制片，扫描电镜观察并拍照。 乱毒素(Sigma)；bFGF(Sigma)；氢化考的松(Sigma)；胎牛血 1．3．2 药物对豚鼠皮肤内黑色细胞中黑色素小体的影响： 清(Gibco)；透射电镜(日立H600型)；驱虫斑鸠菊提取物 ①将各组豚鼠背部的棕黄色区域，把各取材区的毛剃成 (新疆自治区临床药学研究所提供)；其它试剂为国产分析 4crn2的区域，给各组豚鼠分别在腿部肌肉注射药物，给药 纯。 容积0．5ml，每日1次，连续给药21天，以制斑素(补骨脂) 1．2 实验动物：英国短毛豚鼠(新疆医学实验动物中心提 注射液为阳性对照，以不给任何药物刺激为空白对照；后用 供)，体重为250—300g；按豚鼠花色和体重均衡分组，花色 乙醚麻醉，将取材区内的皮肤取下备用；②把新取的豚鼠皮