丹酚酸B对马兜铃酸干预作用的研究.pdfVIP

第46卷 第6期 复旦学报 (自然科学版) Vl01．46 No．6 2007年12月 Journal of Fudan University(Natural Science) Dee．2007 文章编号：0427．7104(2007)06—0996—05 丹酚酸B对马兜铃酸干预作用的研究 刘 青，骆斯慧，陈 灵 (上海交通大学生命科学技术学院，上海200240) 摘 要：为建立马兜铃酸(Aristolochic acid，AA)肾病大鼠模型以及研究丹酚酸B(Salvianolic acid B，SalB)对于马 兜铃酸的干预作用，本实验分别采用了体内灌胃SD大鼠的方法并测定尿肾功能生化指标以及体外小鼠淋巴瘤 细胞试验(Mouse Lymphoma Assay，MLA)微孔法．结果表明用5 mg／kg·d剂量的马兜铃酸灌胃大鼠及用10 mg／kg·d的丹酚酸B治疗所得到的 一微球蛋白、尿N一乙酰一 一D-氨基葡萄糖苷酶、血清肌酐和血清尿素氮生化 指标都有相应变化，与理论结果一致；而MLA实验结果表明丹酚酸B在100 t~g／mL和200 t~g／mL对于马兜铃 酸100~g／mL均具有干预作用，可减小细胞毒性，降低突变频率，且200~g／mL丹酚酸B效果更好． 关键词：肾病大鼠模型；丹酚酸B；马兜铃酸；干预作用 中图分类号：R 963 文献标识码：A 中医中药一直是我国治疗疾病的特色．马兜铃酸(Aristolochic acid，AA)是马兜铃属(Aristolochia)植物 中提取得到的主要成分，具有多种药理作用．而近年来大量研究表明该化合物有较强的致突变、致癌作用， 尤其是肾毒性作用，临床上造成马兜铃酸肾病．而丹酚酸B(Salvianolic acid B，SalB)是中药丹参水抽提液 中的主要有效成分，有报道指出其在体外实验中能够保护肾小管细胞不受马兜铃酸损害 J．本文采用SD 大鼠灌胃方式和生化指标的测定以及小鼠淋巴瘤细胞L5178Y／tk 一一3．7．2c进行研究丹酚酸B在体内 外对于马兜铃酸拮抗干预效果．为进一步研究马兜铃酸的致突变机制和丹酚酸B干预作用机制提供可靠 数据和结果． 1 材料与方法 1．1 材料 马兜铃酸购自Sigma—Aldrich公司(含40％AA I和60％AAⅡ)，丹酚酸B由上海曙光医院肾病实验 室提供；RPMI1640培养基为Gibco产品，马血清为Hyclone产品，青霉素、链霉素和丙酮酸钠购自华美公 司，三氟胸苷购自Sigma公司． 2．微球蛋白放射免疫分析药盒为原子高科公司产品，N一乙酰．J9．D-氨基葡萄糖苷酶试剂盒和肌酐试 剂盒为上海申索佑福医学诊断用品有限公司产品，血尿素氮(BUN)试剂盒为Sysmex公司产品．主要设备 为全自动生化仪(Aeroset Abbott，Toshiba Inc．)． 1．2 SD大鼠体内试验 32只雄性2月龄SD大鼠，购自西普尔．必凯实验动物有限公司，在上海中医药大学附属曙光医院动 物房饲养．在整个实验周期中，动物能够自由取食和饮水．1周适应期后，随机分为3组．模型组( ：12)每 日接受2 mL马兜铃酸(5 mg／kg)灌胃；治疗组(，z=12)，每日接受2 mL马兜铃酸(5 mg／kg)灌胃后，立刻 接受2 mL丹酚酸B(10 mg／kg)灌胃；正常对照组( =8)，每日接受2 mL生理盐水灌胃；以上灌胃持续8 周，每周称量一次体重以调整用药剂量和记录体重变化趋势．马兜铃酸以生理盐水配制成为悬浮液备用． 丹酚酸B以生理盐水灌胃前溶解备用． 收稿日期：2007．09～10 基金项目：上海市科委中药现代化专项“传统经方的药效物质基础及复方减毒规律的研究”(05Dz19733) 作者简介：刘 青(1984一)，女，硕士研究生；通讯联系人陈 灵，男，教授，E～mail：lingchen@sjtu．edu．cn 第6期 刘 青等：丹酚酸B对马兜铃酸干预作用的研究 在第2、4、6和8周末随机选取模型组和治疗组动物各10只以及对照组全部动物置于啮齿类动物代 谢笼中过夜采集尿液样本．在第4周末及第8周末尿液样本采集完毕以后，对大鼠进行断尾采血，每只大