第1专题 生命的物质基础、结构基础第2专题 细胞代谢第3专题....ppt

　　4．MS培养基的成分及各成分作用 　　MS培养基与微生物培养基的区别： 　　(1)微生物培养基包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，以有机营养为主。 　　(2)MS培养基则需要提供大量的无机营养，尤其是植物生长所必需的大量元素和微量元素。 成分 作用 微量和大量元素 提供植物细胞生活所必需的无机盐 蔗糖 提供碳源，维持细胞渗透压 甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇 满足离体植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊营养需求 　　5．植物激素在组织培养过程中的重要作用 　　生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为： 　　(1)在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 　　(2)使用顺序不同，结果不同，具体如下： 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 分化频率提高 　　(3)用量比例不同，结果也不同： 　　(二)月季的花药培养 　　1．被子植物的花粉发育过程 　　花粉母细胞(或小孢子母细胞) 4个小孢子(四分体时期)→单核期小孢子(单核居中、单核靠边期) 双核期(花粉管细胞核和生殖细胞核)→1个生殖细胞 两个精子。也就是说，花粉萌发进行受精作用时，每个花粉粒可释放出两个精子，从而完成被子植物的双受精。 　　2．月季的花药培养实验流程 　　(1)材料的选取：用醋酸洋红法或焙花青——铬矾法(均为碱性染色剂，可使染色体着色)确定花粉是否处于单核期，并进一步确定是处于单核居中期还是单核靠边期。 　　(2)材料的消毒：完全未开放的花蕾→放入体积分数为70%酒精浸泡30 s→无菌水冲洗 放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4 min →无菌水冲洗3～5次。 　　(3)接种：无菌条件下除去花蕾的萼片、花瓣、花丝，将花药接种于培养基上，每瓶接种花药7～10个。 　　(4)培养： 　　 　　(5)鉴定和筛选 　　3．影响花药培养的因素 　　(1)诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素。 　　(2)最适宜的花药发育时期会因植物种类的不同而不同，但对大多数植物而言，适宜进行花粉培养的时期是单核期，即细胞核由中央移向细胞一侧的时期。 　　4．菊花组织培养与月季花药培养的比较 菊花组织培养 月季花药培养 相 同 点 原理 都是细胞的全能性 环节 培养基配制方法、无菌技术及接种操作基本相同 条件 受激素、pH、温度、光照等条件影响 不 同 点 选材 未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 合适的花粉发育时期 培养基 MS培养基 配方要求更严格 流程 制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→消毒→接种→培养→鉴定和筛选→移栽 示范解析 　　●例1　育种工作者常采用花药培养的方法，使花粉粒发育成单倍体植株。下图是采用水稻的花药进行培养的流程图。据图回答下列问题： 　　选取水稻花药→对花蕾消毒→接种和培养→植物体 　　(1)选取的水稻花药应为________期，此时细胞核由中央移向细胞一侧，花药培养成功率最高。 　　(2)通过花药培养产生单倍体植株一般有两种途径：一种是花粉通过________阶段发育为植株；另一种是在诱导培养基上先形成________，再将其诱导分化成植株。 　　(3)试管苗形成过程中，必须从培养基中获得__________和小分子有机物质等营养物质。要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有________和________两类植物激素。 　　(4)若接种过花药的培养基被污染了，则可能的原因有哪些？(至少写出两条) _________________________________。 　　【解析】选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。在花粉的发育过程中，单核期细胞核由中央移向细胞的一侧，花药培养成功率最高。单核期以前的花药，质地幼嫩，极易破碎；单核期以后的花药，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难，因此,都不宜作为接种的对象。通过花药培养产生花粉植株(即单倍体植株)一般有两种途径：一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。试管苗所需的营养均由培养基提供，外植体消毒不彻底,无菌操作不规范等都会造成培养基被污染。 　　[答案]　(1)单核　(2)胚状体　愈伤组织　(3)无机盐或矿质元素　生长素　细胞分裂素　(4)①培养基灭菌不彻底