儿茶素抗ox-LDL作用的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„Ⅰ ABSTRACT „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„II 前 言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 1 一、实验材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 3 （一）实验材料 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 1.细胞株 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 2.实验药品 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 3.主要试剂 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 4.主要仪器 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 5.试剂配制 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4 （二）实验方法与步骤„„„„„„„„„„„„„„„„„„„5 二、实验结果 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„11 三、分析与讨论 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„15 四、结论 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„21 参考文献 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„22 附图 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„25 致谢 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„29 文献综述 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„30 万方数据 中文摘要 儿茶素抗 ox-LDL 作用的研究 目的 本课题探讨儿茶素抗氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导小鼠源巨噬细胞 RAW264.7 过量表达清道夫受体（SR-A1）的作用，为儿茶素防治动脉粥样硬化提供一定 的实验基础。 方法 利用 MTT 法测定儿茶素的最佳有效浓度。荧光素标记 ox-LDL 配体法，结合 荧光显微镜和流式细胞仪分析儿茶素干预 ox-LDL 诱导巨噬细胞过量表达清道夫受体的 作用。小鼠巨噬细胞系 RAW264.7 经 ox-LDL 诱导作用，并经儿茶素干预作用后提取细 胞的总RNA 实时荧光定量 PCR 检测 SR-A1 的基因表达水平。 结果 ①儿茶素在 400 μg/ml 浓度以下不会抑制 RAW264.7 细胞的增殖；②4～ 100µg/ml 内的儿茶素能够抑制ox-LDL 诱导 RAW264.7 细胞过量表达 SR 的作用，且随着 药物浓度的增加，抑制作用增强；③实时荧光定量 PCR 已基本构建小鼠SR-A1 引物的体 外转录系统。 结论 儿茶素的抗 ox-LDL 诱导小鼠源巨噬细胞 RAW264.7 过量表达清道夫受体 （SR-A1）的作用可能是儿茶素防治动脉粥样硬化的机理之一。 主题词 儿茶素，巨噬细胞，实时荧光定量 PCR I 万方数据 ABSTRACT The study of anti-ox-LDL on Catechin Objective this issue discusses the catechin anti-oxidized low density lipoprotein (ox-LDL) induced mouse