昆明白族儿童HLA-DRB1、DQB1位点基因多态性分析.pdfVIP

黄永坤等 昆明白族儿童HIA．DRB1、DQB1位点基因多态性分析 第9期 · 遗传免疫学 · 昆明白族儿童HLA．DRB1、DQB1位点基因多态性分析① 黄永坤 王美芬 郝 萍② 杨 武 戚 勤 唐睿珠② 文革生 李海林 周丽芳 (昆明医学院第一附属医院儿科，昆明650032) 中国图书分类号 R392．1l 文献标识码 A 文章编号 1000-484X(2oo7)09-0833-02 主要组织相容性复合体(MHC)是染色体上的一 所附说明，读板纸为该试剂盒所附。 群紧密连锁的基因群，可作为一个遗传单 单倍型 1．3 统计分析 用直接计算法统计 HLA-DRB1、 而遗传，属共显性等位基因¨j。人类的MHC称人类 DQB1各等位基因的基因频率，样本分布经Hardy- 白细胞抗原(HLA)系统，位于人的第6对染色体短臂 Weinberg平衡检验。 上。HLA-DR、DQ抗原是异基因移植免疫反应中最重 带 要的抗原之一，决定其特异性的主要编码基因DRB1、 一 一 DQB1具有高度多态性，其对HLA与疾病相关性及人 在本研究中，70名昆明白族儿童HLA。DRB1位 类遗传学等研究均具有重要意义 。近年来，国外已 点上共检出等位基因15个，见表1，其中DRB1 经对不同人种和民族的HLA分布隋况作了大量的调 0801及 0401、 1201基因频率最高，分别为 查研究，我国对不同地区汉族群体HLA遗传学的研 20．7％、16．4％，而DRB1 0101、 0103、 0307、 究也在不断地深入，同时对少数民族的HLA DNA多 1001基因频率最低，各自仅占0．7％。 态性的研究报道也逐渐增多，但尚未见昆明地区白族 DQB1位点共检出等位基因7个，见表2，其等 HLA-DRB1、DQB1等位基因多态性研究报道 。本 位基因频率由高到低依次为DQB1 0301、DQB1 研究应用PCR-SSP技术对昆明地区70名白族儿童 06、DQB1 05、DQB1 04、DQB1 0303、DQB1 HLA-DRB1、DQB1等位基因进行检测分析，旨在探讨 0302、DQB1 0201，其中DQB1 0301、 0601基因 昆明白族人群HLA—DRB1、DQB1等位基因频率分布， 频率最高，分别为23％、21％，而 0201／02、 0302 从而提供遗传学方面的数据。 基因频率最低，各自占4％、6．4％。 1 材料与方法 表1 昆明白族儿童HLA-DRB1等位基因的频率分布 1．1 样本来源 2003年7月于昆明市某民族小 Tab．1 Distribution of HLA-DRB!allele frequencies in 学，抽取无血缘关系的70名年龄在6～12岁的白族 Kunming Bai nationality children 儿童为研究对象，每人抽取静脉血2 ml，EDTA抗凝 初步处理后置于一70~C冰箱保存，男女比为1：1。 1．2 实验方法 1．2．1 基因组DNA制备 采用血液基因组DNA 提取试剂盒(美国Promega公司生产，批号：204337) 在常温下快速提取儿童血液基因组DNA。 1．2．2 HLA-DRB1、DQB1位点基因分型 采用DNA 分型试剂盒(美国PEL。FREEZE CLINICAL SYSTEMS 公司)(PCR-SSP)扩增HLA-DRB1、DQB1 DNA片段， PCR反应体系、循环条件、操作方法及结果读判均按 ①本文受云南省教育厅重点项目基金(编号：04Z065C)资助 ②昆明医学院第一附属医院临床实验中心，昆明650032 作者简介：黄永坤(1961年一)，男，教授，硕士生导师，主要从事tJ,JL 消化、感染与免疫研究，E-mall：hykkmyncn@hotmal1．con。