自由基和基因突变与人类老化的关系.PDFVIP

自由基和基因突變與人類老化的關係 魏耀揮 國立陽明大學生化研究所 一、我們為什麼會老化？ 老化是動物或人體逐漸喪失各器官和組織的正常功能，導致個體本身容易 罹患疾病、活力降低，而終至死亡的過程。導致人體老化的因素很多，自古以來 就有不少王卿將相和士紳富豪積極尋求長生不老之術，生物醫學研究者和臨床醫 師更是不斷地探究老化的原因及抗衰老的祕訣。近百年來，有關老化的研究以及 被提出的有關老化的假說多不勝數，眾說紛紜，莫衷一是。而這些假說歸納起來 大致可以分成兩大類： 1. 基因決定論：屬於這一類的假說倡言老化是生命中不可避免的遭遇，這派學 者認為，老化是一個命定（programmed ）及不可逆轉的（irreversible ）過程， 而控制這個過程的訊息或基因在生命誕生之時就已記載在每一個體的DNA 中了。基本上，這一派的科學家認為老化是生物發展（ development ）過程的 晚期。的確，有一些與生物對壓力的反應或 DNA代謝有關的基因（泛稱老 化基因，senescence gene ）已被證實在老化過程中發生了質和量的變化。 2. 錯誤累積論：這一類的假說倡言老化是生物體內的生化分子損傷不斷累積的 結果。這一派的學者認為生物在發展成長的過程中，體細胞不斷累積內源性 （endogenous ）和外源性（exogenous ）破壞因子對組織器官的傷害；當組織 細胞內的損傷累積至一定量並嚴重影響維持其生命的各種基本功能時，組織 器官就發生病變以導個體的死亡。上述之氧化代謝所產生的活性氧分子 （reactive oxygen species ，簡稱ROS ）屬於內源性破壞因子，而外源性因子 則包括病毒、細菌、紫外線、輻射線、藥物、毒物及環境污染物等。 動物和人體細胞粒線體處在一個充滿 ROS及自由基的高氧壓環境，而參與 製造呼吸酵素的粒線體DNA則位於產生 ROS及自由基最旺盛的粒線體內膜 上，因此粒線體內膜上的呼吸酵素系統必然會受到極高程度的氧化性破壞。近幾 1 年來，我們和國外的研究者分別觀察到人類肌肉和肝臟細胞粒線體功能隨著年紀 增加而下降的現象，尤其是在能量消耗較大的器官（如：腦、骨骼肌、心肌和肝 臟），這種下降的趨勢特別明顯，而這些器官生理功能的衰退也是老化初期最先 顯現的癥狀（肌肉無力或記憶力衰退等）。為了探究粒線體呼吸功能隨著老化而 下降的基本原因，我們和幾個國外的研究室乃自 1990 年開始探究粒線體內在老 化過程中遭受破壞的生化分子。我們首先鎖定高突變率的粒線體 DNA ，運用各 種分子生物學技術有系統地偵測老年人組織之細胞粒線體 DNA可能發生的突 變。另一方面，我們也發展了一套半定量 PCR 技術來分析人體各組織中的突變 型粒線體 DNA 之含量。過去十餘年來的研究顯示：粒線體 DNA 突變的確在人 類以及其他動物的老化過程中扮演了極為重要的角色。 二、粒線體是人類細胞產生自由基的主要部位 自從 Albert Lehninger教授和他的學生Eugene Kennedy在 1948 年成功地自大 白鼠肝細胞分離純化出具完整結構與功能的粒線體以來，生物能量學 （bioenergetics ）領域的學者一直都將此一領域的焦點放在粒線體的呼吸與氧化 磷酸化作用的機制及其調節的研究上。經過四十餘年的努力，許多一流的生物化 學及生物物理學家合作闡明了細胞合成ATP的分子機轉。二十餘年來，學界已普 遍接受了英國生化學家Peter Mitchell在 1961 年所提倡的化學滲透學說 （chemiosmotic theory ），認為粒線體是靠著電子傳遞過程所泵出的氫離子所形成 的電化學電位差來驅動 ATP的合成。然而，粒線體具有另一些鮮為人知的危險特 性。事實上，動物及人類細胞內百分之九十以上的氧是由粒線體所消耗掉，而其 中百分之一到百分之五的氧分子在正常生理情況下會轉變成 ROS 。此外，粒線體 的電子傳遞鏈也會不斷地產生其他的自由基，包括 ubisemiquinone及 flavosemiquinone 等有機物半酮基。據保守的估計，粒線體內的自由基濃度經常 -11 維持在 10 M左右。粒線體內膜含有很豐富的