金线鱼鱼皮抗冻蛋白酶法制备工艺优化.PDFVIP

第 33 卷 第 5 期 农 业 工 程 学 报 Vol.33 No.5 2017 年 3 月 Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering Mar. 2017 301 金线鱼鱼皮抗冻蛋白酶法制备工艺优化 张 怡，吴 珊，傅维擎，黄灿灿，曾红亮，郑宝东 （福建农林大学食品科学学院，福州350002 ） 摘 要：为了探讨金线鱼鱼皮抗冻蛋白的酶法高效制备工艺，该文首先探究不同蛋白酶酶解获得的酶解产物的热滞活性 （thermal hysteresis activity ，THA ）以及不同分子区间的酶解产物的热滞活性。随后以抗冻蛋白得率为指标优化了底物与 酶的比例、酶解时间、酶解温度以及 pH 值，并采用响应面法探究抗冻蛋白的最佳酶解工艺。最后使用差示扫描量热仪 （differential scanning calorimeter，DSC ）测定验证抗冻蛋白的热滞活性。结果表明：在碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜 蛋白酶以及复合蛋白酶 4 种酶的最佳酶解条件下，碱性蛋白酶酶解所获得抗冻蛋白热滞活性最大，选择碱性蛋白酶作为 制备金线鱼鱼皮抗冻蛋白的最佳蛋白酶；截留分子量为≥5～10 kDa 鱼皮蛋白的抗冻效果最佳，热滞活性达 1.200.07 ℃， 确定≥5～10 kDa 鱼皮蛋白得率作为酶解制备工艺的指标；得到金线鱼鱼皮抗冻蛋白最佳的酶解制备工艺条件为：底物与 酶比例为 32 ∶1、酶解时间为 147 min、酶解温度为 50 ℃和 pH 值为 9 ，在此条件下，金线鱼鱼皮抗冻蛋白得率为 49.25%±1.34% 。相比于牛血清蛋白（bovine serum albumin ，BSA ），其降低了溶液起始结晶的温度；在最佳的保留温度条 件下，其热滞活性为 1.2 ℃。碱性蛋白酶酶解制备鱼皮抗冻蛋白是一种快速有效的方式，酶解获得的抗冻蛋白热滞活性 高。该结果为综合发展和利用金线鱼鱼皮提供一定的理论依据。 关键词：蛋白；酶；优化；鱼皮；金线鱼；热滞活性 doi ：10.11975/j.issn.1002-6819.2017.05.043 中图分类号：TS254.9 文献标志码：A 文章编号：1002-6819(2017)-05-0301-07 张 怡，吴 珊，傅维擎，黄灿灿，曾红亮，郑宝东. 金线鱼鱼皮抗冻蛋白酶法制备工艺优化[J]. 农业工程学报，2017， 33(5)：301－307. doi ：10.11975/j.issn.1002-6819.2017.05.043 Zhang Yi, Wu Shan, Fu Weiqing, Huang Cancan, Zeng Hongliang, Zheng Baodong. Optimization of preparation of antifreeze proteins of fish skin from Nemipterus virgatus by using protease[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering (Transactions of the CSAE), 2017, 33(5): 301 －307. (in Chinese with English abstract) doi ：10.11975/j.issn.1002-6819.2017.05.043 [4] 质的总称 。它能以非依数性的形式降低水溶液的冰点， 0 引 言 