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2017-09-02 发布于天津
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10 个品系小鼠的rapd 分析3 - current zoology

动物学报　48 (3) :429～432 , 2002 A cta Zoologica S inica 　　　　　　 10 个品系小鼠的 RAPD 分析 ① ① ② 李淑蓉　陈意生　魏　泓 ( ①第三军医大学西南医院病理学研究所 , 重庆 400038) ( ②第三军医大学实验动物中心 , 重庆 400038) 关键词　小鼠　RAPD 　遗传监测　亲缘关系　　小鼠是应用最为广泛的实验动物 , 预先了解品引物为 10 个碱基的寡聚核苷酸 , 实验用 AB0320 系或近交系的遗传纯度或系间遗传距离 , 对于试验 kit6 、AB0320kit7 、AB0320kit8 、AB0320kit9 材料的选取和实验结果分析都有很大帮助。传统的四套引物 , 每套 20 个引物 , 共 80 条。10 × 实验动物遗传监测多限于基因表型的检测 , 检测位 buffer 、Taq 酶、MgCl2 、dN TP 均为上海生工产点在整个基因组中所占比例小 , 分布不均。由于品。 RAPD 方法的优势 , 用一系列引物可检测出覆盖整 14 　RAPD 反应条件及扩增程序 μ μ 个基因组的遗传改变 , 在动、植物品系鉴定和遗传反应总体积为 25 l , 其中含 2 5 l 10 × 监测方面已取得大量成果 ( 陈洪等 , 1994 ; 沈曦 buffer 、2 5 mmol/ L MgCl2 、02 mmol/ L dN TP 、等 , 1999) , 但对多品系小鼠的研究报道较少。因 15 ng 引物、25～50 ng 模板 DNA 和 TaqDNA 聚合此 , 本研究选用 10 个常用小鼠品系 , 筛选较好的酶 15 个单位。反应程序为 : 94 ℃预变性 2 min ; 多态标记 , 建立各品系的 RAPD 图谱 , 以区分不 94 ℃1 min , 38 ℃1 min , 72 ℃2 min , 40 个循环同品系的小鼠 , 为今后的质量监测工作提供参照标后72 ℃延伸 10 min 。扩增产物在含溴化乙锭的准 ; 同时根据 RAPD 扩增结果计算出各品系间的 15 %琼脂糖凝胶中电泳 , 紫外透射仪上观察照相。相对遗传距离 , 在 DNA 水平探讨不同品系小鼠间 15 　数据处理的亲缘关系。在扩增条带清晰 , 多态性较好的引物中 , 选取 10 条引物的扩增结果进行统计 , 根据 Nei 等 1 　材料和方法 ( 1979) 的公式 F = 2Nxy/ (N x + Ny ) 计算出随机 11 　材料扩增多态 DNA 片段的遗传相似指数 F ( 也称共享 ) ( 实验用 TA2 、T739 、615 、C57BL/ 6J 、BALB/ 度和不同品系间的平均遗传距离指数 P 1 ～ c 、BALB/ c- nu 、DBA/ 2 和 SCID 近交系小鼠各