人参皂苷Rg2对体外培养低氧心肌细胞的保护作用.docVIP

　　人参皂苷Rg2对体外培养低氧心肌细胞的保护作用 【摘要】 目的 观察人参皂苷Rg2对低氧心肌细胞的保护作用。方法 取新生24 h的DA）、一氧化氮(NO)的含量。结果 人参皂苷Rg2组与正常组心肌细胞凋亡率比模型组明显降低（F=4.75,q=6.44~8.09,Plt;0.05）；人参皂苷Rg2组与正常组心肌细胞SOD活性、MDA和NO含量与模型组相比差异有显著性（F=5.67~13.72,q=4.35~13.68,Plt;0.05）。结论 人参皂苷Rg2在体外有抗低氧损伤的作用，其作用机制可能是通过抑制细胞凋亡、提高抗氧化酶的活力、清除自由基而发挥作用。 【关键词】 人参皂苷；肌细胞, 心脏；细胞培养技术；低氧;自由基 ［ABSTRACT］ Objective To investigate the protection of Rg2 on hypoxic cardiocytes. Methods Cardiocytes of 24 hour old neal group, model group and Rg2 group. Rg2 (0.025 mmol/L) al group and model group. All odel group and Rg2 group eothermic hermetic container, and given 95% N2 and 5% CO2 and mixed. The morphological changes etry (FCM). The contents of MDA and NO and the activity of SOD ined by biochemical method. Results pared odel group, the apoptosis significantly decreased in the Rg2 and the normal groups (F=4.75,q=6.44-8.09,Plt;0.05). pared odel group, the activity of SOD, the contents of MDA and NO in Rg2 group and normal group shoyocardial cells against anoxia in vitro possibly through inhibiting cell apoptosis, increasing the energy of antioxidase and eliminating free radicles. ［KEY yocytes, cardiac; Cell culture technique; Anoxia; Free radicle 缺血低氧是众多心脏疾病共有的病理学基础，而临床上对心脏病的治疗也是以改善心肌供血，预防及纠正心肌缺血低氧造成的损害为根本。人参是传统的名贵中药,有重要的药用价值和经济意义。目前，多种人参的复合制剂已广泛应用于治疗心脏疾病［1～3］。人参皂苷Rg2是人参三醇的组成成分，文献报道人参皂苷具有抗细胞凋亡的作用［4,5］。本实验通过体外培养成熟心肌细胞，建立急性气体低氧模型，锥虫蓝染色细胞计数，并做流式细胞仪检测以及酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MAD)、一氧化氮(NO)的含量，以此来探讨人参皂苷Rg2体外是否有抗低氧损伤的作用及其作用机制，为临床用药提供依据。 1 材料和方法 1.1 实验动物 新生24 h的EM、小牛血清(杭州四季青生物材料工程公司)，SOD、MAD、NO试剂盒(南京建成生物工程研究所)，多聚赖氨酸(Sigma公司)。 1.3 主要仪器设备 OLYMPUS,BX 50,PM-20 系统显微镜(日本),PM-6，OLYMPUS解剖显微镜(日本),二氧化碳细胞培养箱(上海福玛实验设备有限公司),YJ超净工作台（垂直单向流型，苏州市洁净技术研究所）。 1.4 方法 1.4.1 心肌细胞培养及鉴定 24 h大鼠乳鼠，以体积分数0.75的乙醇浸泡消毒，开胸取出心脏，放入PBS中冲洗，尽量去除血迹。将心尖部肌肉剪成2 mm×2 mm×2 mm左右碎块，加入胶原酶、胰蛋白酶消化，反复吹打，悬液沉淀后，吸取上清液(弃第一次收集液)，直至将组织块完全消化为止，然后将所收集的细胞悬液1 500 r/min离心15 min，沉淀PBS洗2次。加入培养液(体积分数0.10 的FBS，体积分数0.10 HS，M199与DMEM 比例为1∶4，0.1 mmol/L MBrdU)，将细胞浓度调整为l×109 /L，然后以每孔2 mL接种于6孔培养板中。4 d后光镜观察。