动态比浊法测定舒血宁注射液中细菌内毒素.pdfVIP

· 598· Herald of Medicine Vo1．27 No．5 May 2008 水浴中加热2 h后，作为热破坏溶液。上述酸、碱破坏溶液分别 2．2．3 最低检出限 在选定的色谱分离条件下，当浓度为0．6 中和后用水稀释至刻度作为测定液，其余样品用水稀释至刻度 g·mL～，进样量为20 L时，SIN3，即草酸的最低检出限为 作为测定液。按“2．1．1”项下条件，各进样20 L。各破坏降解 12 ng。 产物与主峰均能很好分离。②最低检出限。在选定的色谱分 2．2．4 样品中草酸的测定 取本品适量，加水溶解并制成每 离条件下，当浓度为0．2 g·mL～，进样量为20 时，S／N 1 mL中含2 mg的溶液，作为供试品溶液；另取草酸二水物适 3，即奥沙利铂的最低检出限为4 ng。③样品测定。含量测定： 量，加水溶解并稀释制成每1 mL中含草酸4 g的溶液(草酸与 精密称取奥沙利铂样品与对照品各适量，加水溶解并定量稀释 其二水物之间的折算系数为0．714)，摇匀，作为对照品溶液。 制成0．4 mg·mL。的溶液，取20 L注入高效液相色谱仪。 精密量取供试品溶液和对照品溶液各20 分别进样。结果 有关物质：取本品适量，加水溶解并制成每1 mL中含1 mg 均未检出草酸。 的供试品溶液和1 mL中含10 g的对照溶液。取对照溶液 3 讨论 20 注入高效液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰的 在有关物质检测条件下，经二极管阵列检测器检测，草酸不 峰高约为满量程的20％；再精密量取供试品溶液和对照溶液各 出峰，奥沙利铂在250 nm波长处有最大吸收，硝酸钾与环己二胺 20止，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保 合铂约在205 BITI波长外有较大吸收；经测定，在205 nm波长处 留时间的2倍。各杂质峰面积的总和用自身对照法计算，结果见 测定，奥沙利铂与中间体的相对响应因子约为1，故以205 nm作 表2。 为有关物质检测波长，以250 nm为含量测定检测波长。 表2 3批样品含量及有关物质测定结果 草酸为奥沙利铂合成中间体 6 ，故奥沙利铂的质量必须 控制其含量。草酸在有关物质系统中不出峰，故制订另一色谱 条件以控制起始反应物。经研究，草酸在200 nm波长处有最大 吸收，但该波长处波动大，故选用210 nm为测定波长，检测灵敏 度符合要求。样品溶液及草酸对照溶液极不稳定，在溶液配制 2．2 草酸测定 后30 min时峰面积即增加，故测定溶液需配制后立即测定。 2．2．1 色谱条件 色谱柱：Alhimate C18(150 mm×4．6 mm， 草酸测定系统中，溶液连续进样3针后，基线噪音变大，故 5 m)；流动相：pH值为6．0的磷酸盐缓冲液(取1．36 g磷酸二 需用0．01 tool·L 醋酸与测定液交替进样以消除基线噪音。 氢钾，加10％四丁基氢氧化铵10 mL，加水溶解至1 000 mL，用 [参考文献] 磷酸调节pH值至6．0)一乙睛(80：20)，检测波长为210 nm，柱 [1] 郭德嵩，陈世铭．第三代铂类抗癌药物奥沙利铂的研究进展[J]． 温为40℃，流速：1．0 mL·min～。