紫外光谱法研究组氨酸三肽与DNA的相互作用论文.pdfVIP

第44卷专辑 西北师范大学学报(自然科学版) 495 紫外光谱法研究组氨酸三肽与DNA的相互作用 冯业振1，马丽1，卢奎1，2+ 1河南工业大学 化学化工学院，郑州(450001) 2河南工程学院，郑州(451191) 摘要：本实验用紫外光谱法研究了组氨酸三肽与ct—DNA的相互作用．研究表明，在模 拟体液条件下，组氨酸三肽能与ct-DNA发生相互作用，计算得其结合常数为2．7×104 L．mol～． 关键词：组氨酸三肤；DNA；相互作用 1．引言 研究药物小分子与DNA的相互作用有助于从分子水平上了解药物的作用机理，可为 设计临床上更为有效的药物提供指导，因此，DNA与药物小分子的相互作用是化学、生物 学和医学中的重大课题{Il。寡肽类化合物一般具有较强的生物活性，多数可作为药物或药物 前体【2l。应用活性肽可作为药物疫苗、导向药物及药物先导化合物等，因此对寡肽的研究具 有广泛的应用价值13l。组氨酸三肽是具有咪唑环和酰氨键的化合物，具有较好的生物活性。 本研究在于揭示组氨酸三肽与DNA相互作用机理，关于二者相互作用的研究尚未见报道。 2．实验部分 2．1仪器与试剂 Tu．1810紫外．可见分光光度计(北京普析通用仪器公司)，PsH一3C型精密pH计(上海 精密科学仪器有限公司)。 7．0 ct．DNA(B．R．，Sigma公司)，pHTris．HCl缓冲溶液，组氨酸三肽(实验室合成)，其 它试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水。 2．2实验方法 mol·L。1 在一系列5mL比色管中加入等量的ct．DNA，依次逐渐加入组氨酸三肽，0．1 mol·L一，组氨酸三肽浓度依次 pH=7．O的Tris．HCl缓冲溶液定溶至刻度，cDNA．4．95×10。5 为Om01．L一，4．64×10。5m01．L一，1．39×10-4m01．L一，2．32×10-4mol·L-1，3．25×10．4mol·L～。在 37℃水浴中放置30min，测定体系的紫外吸收光谱。 3．结果与讨论 3．1组氨酸三肽与ct．DNA相互作用的紫外光谱 图1为在pH ct．DNA与组氨酸三肽同时存在扣除背景的紫外吸收光谱。由图l可以看出，ct．DNA加入 组氨酸三肽后，在260nm处的紫外吸收降低，呈减色效应。 通常认为，减色效应是DNA分子纵向收缩或伸长发生构象变化的结果，增色效应是 4％ 全国第}心届大环化学暨第^届超分子化学学术研讨会论立专辑 DNA双螺旋结构被破坏的结果n由此可见组氨酸三肚与昨DNA共存的紫外吸收光谱不 是二者单独存在时吸光度值的简单加和，推测是由于组氨酸三肽与ct．DNA上的带负电的 磷酸根发生静电作用，中和了双螺旋骨架上部分负电荷．减弱了由于磷酸基团静电排斥作 用而产生的张力，从而使DNA链发生收缩。 ．久 f．埔 ’‰{f—{7_=乎——#一- 目i￡§＆=n5舳N^“§*月∞t*^m日目2㈣*断i”#m■№=＆5d-oNA∞ 《m镕☆#n 32表观结合常数的计算 通过Ro辩nm排作图法计算组氨酸二肽与cl-DNA体系的表观结合常数‘5“，已知．An『A 即可得K。其中A和山分别为组氨酸三肚-DNA体系、组氨酸三肚以Tr隆Hcl缓冲溶液 作参比的吸光度值，p为体系中c}DNA的浓度．f为组氨酸二肽的浓度。由结果可知，结 7×104Lmo一。 台常数K=2 IL鸯：目￡自％科学基备(205720lE 参考文献 r11 chenW丁u『mC，Fn∞血mL^n“J孙vsCheBl蜥．10l：6蝴5-7003 f21裴醺崩，吴颗首都师趸太学学报(自然科学版)，2州，2×3)56 015-l016 Ⅲ邢其毅，徐目秋，周政，等基m有