整合素β1、β5基因在人脑胶质瘤中表达的研究.pdfVIP

北京医学2008年第30卷第7期 · 437 · ． 短篇论著 · 整合素p 1、p 5基因在人脑胶质瘤中表达的研究 孟国路 李红利z 张懋植 王硕 徐宇伦 赵继宗 整合素是一类细胞表面受体家族的总称．作为一种多功 表1 整合素B1的表达比较(例) 能蛋白．连接细胞外基质与细胞内结构和功能构架，参与细 胞双向信号传导．调节多种生物学过程．其在脑内的分布非 常广泛。整合素亚单位 B1、B5能够参与肿瘤细胞的迁移、侵 犯以及肿瘤的血管形成… 2006年l1月至20o7年3月，我 们对48例不同分级的胶质瘤标本和13例手术切除的挫裂 伤脑组织标本检测整合素 B1、B5基因的表达情况，以探讨其 与胶质瘤恶性程度的关系，报告如下。 对象与方法 表2 整合素 135的表达比较(例) 1．一般资料：本组48例．男 30例，女 18例：年龄 8～62 岁，平均39．1岁。其中胶质瘤Ⅱ级22例，Ⅲ级12例，Ⅳ级 14 例。选择外伤手术切除的挫裂伤脑组织作为对照标本，共 l3 例。新鲜标本，切除后30min内投入液态氮中保存。 针对人整合素 B1全长的小鼠IgG单克隆抗体以及针对 人整合素B5近羧基端635—730氨基酸的兔多克隆抗体，购 白美国Santa Cruz生物技术公司 B1、B5都能影响血管生成，是肿瘤血管内皮细胞增生的重要 2．方法：组织冰冻切片(5～lOIxm)。4℃丙酮固定。应用免 疫组化试剂盒染色：滴加试剂1(封闭用正常血清工作液1，室 标志 ]。整合素可以在多种途径促进细胞迁移．既能够为细 温孵育10～15min，倾去；滴加 1：50稀释的一抗．4℃过夜； 胞迁移提供支点．又参与细胞收缩的信号传导[“]。整合素在 PBS液冲洗3min，3次。滴加试剂2(生物素标记羊抗小鼠或兔 胶质瘤边缘的高表达进一步提示了整合素在肿瘤细胞迁移中 IgG)，37~C孵育 10～15min；PBS液冲洗3min，3次；滴加试剂3 的重要作用[ (辣根酶标记链霉卵白素工作液)。37℃孵育10～15min：PBS液 本研究结果显示，脑组织、低级别胶质瘤和高级别胶质 冲洗3min，3次，DAB显色剂显色。苏木精复染 无水乙醇、丙 瘤中整合素B1、B5的表达依次增高，并有显著性差异 说明 酮、二甲苯脱水透明。树脂胶封片。显微镜下观察切片，并照 整合素B1、B5的表达和胶质瘤的恶性程度成正比。胶质瘤恶 相。 性程度越高，肿瘤细胞的迁移能力就越强．肿瘤中的血管生成 结果判断：随机选择5个高倍视野．细胞胞浆呈棕黄色 也就越强烈。提示整合素在胶质瘤的发展、侵犯以及胶质瘤的 者，为阳性细胞。阳性细胞数占总数≤25％的病例归为低表达 血管生成中起重要作用．而整合素的拮抗药物将可能是肿瘤 组(包括阴性表达病例)；阳性细胞数25％的病例归为高表达 治疗的有效药物 组。由病理科与试验无关的医生在不知道病理结果的情况下 参与胶质瘤迁移和血管生长的整合素有多种．它们的生 进行结果判断 物学过程可能有重叠，或完全独立。所以在肿瘤的治疗过程中 3．统计学方法：应用SPSS统计软件，行 检验。 应该有拮抗多种整合素的作用．而不是只针对一种。整合素在 结 果 胶质瘤中的表达并不是一成不变的．而是随着肿瘤恶性程度 1．脑组织，胶质瘤2级，胶质瘤 3、4级组整合素B1的高 的增强，整合素的总体表达亦增强。同时整合素的表达也存在 表