miR-125b在儿童AML中的表达及其反义寡核苷酸对白血病细胞的作用.pdfVIP

· 738 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(4)：738—741 [文章编号] 1000—4718(20121o4—0738—04 miR一125b在儿童 AML中的表达及其 反义寡核苷酸对 白血病细胞 的作用 ：=l 刘晓丹 ， 徐 令 ， 檀卫平 ， 颜慕霞 (中山大学孙逸仙纪念医院。医学研究中心 3儿科，广东 广州 510120；广州市妇女儿童医疗中心血液科 ，广东 广州 510623) [摘 要] 目的：研究儿童急性髓细胞白血病 (AML)患者骨髓细胞中miR一125b的表达及miR一125b为靶 标的反义寡核苷酸对人白血病细胞的作用。方法：采用基因芯片和实时荧光定量 PCR技术 (qRT—PCR)检测儿童 AML治疗前后骨髓细胞中miR一125b的表达。采用电转法将与miR一125b序列互补的反义寡核苷酸转染HL一60 细胞，细胞计数试剂盒 (CCK一8)检测转染后24h、48h、72h、96h细胞增殖情况。结果 ：芯片结果显示miR一125b 在儿童AML中表达明显增高，约为正常的12倍，qRT—PCR结果进一步证实了miR一125b在儿童 AML中异常高 表达，同时还发现miR一125b在儿童 AML部分缓解的患者骨髓细胞中表达下降，在完全缓解患者骨髓细胞中降至 正常水平。CCK一8结果显示 ，针对miR一125b的反义寡核苷酸能有效抑制白血病细胞的增殖 ，与对照组相比有显 著差异 (P0．01)。结论：miR一125b在儿童AML中可能起 “癌基因”作用 ，以miR一125b为靶标的反义寡核苷酸 可能为儿童AML治疗提供新的方法。 [关键词] miR一125b；寡核苷酸类，反义；HL一60细胞 [中图分类号] R342．7 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．40．029 Expression ofmiR ——125b in pediatricacutemyeloid leukemia and the effectofanti-—miR --125b oligonucleotideonproliferation ofhuman leu— kemiccells LIU Xiao—dan ，XU Ling ，TAN Wei—ping ，YAN Mu—xia2 (TheCenterofMedicalResearch，DepartmentofPediatrics，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity， Guangzhou510120，China；DepartmentofHematology，GuangzhouWomenandChildrensMedicalCenter，Guangzhou 510623，hCina．E—mail：luoxu164@yahoo．corn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheexpressionofmiR一125binpediatricacutemyeloidleukemia(AML)， andtoexploretheinhibitoryeffectofanti—miR 一125boligonueleotideonhumanleukemiccells．METHODS：Theex． pressionofmiRNAsinpediatricAMLbonertlalTowceHswasanalyzedbygenemicroarrayandreal—timequantitativePCR． HL一60cellsweretransfectedwithanti—miR一125b，whichwascomplementarytomiR一125binsequence，andthevia— bilityofHL一60cellswasmeasuredbyCCK一8assay24h，48h，72hand96hafterelectroporation．RESULTS：The expressionlevelsofmiR一125