高产番茄红素链霉菌选育及摇瓶发酵研究.pdf

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２９（１２）：６４～６８ 高产番茄红素链霉菌选育及摇瓶发酵研究   王　敏　杨　慧　高俊莲 　马荣才 （北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心　北京　１０００９７） 摘要　番茄红素的抗氧化能力目前在类胡萝卜素中最强，是近年来国际上功能食品成分研究的热 点。在国内首次利用龟裂链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｒｉｍｏｓｕｓ）发酵生产番茄红素，建立了分光光度计法和 ＨＰＬＣ法等番茄红素测定方法；以一株龟裂链霉菌Ｆｃ作为出发菌株，进行紫外诱变，筛选到一株突变 高产菌株Ｆｃ’，其番茄红素产量较出发菌株提高２．５倍；通过摇瓶发酵实验优化培养条件，使菌株 Ｆｃ’的番茄红素产量达到２３０ｍｇ／Ｌ，并且在不添加任何阻断剂的情况下，利用链霉菌发酵可获得纯 度较高的番茄红素。该结果为今后利用链霉菌工业化生产番茄红素奠定了良好基础。 关键词　番茄红素　龟裂链霉菌　紫外诱变　摇瓶发酵　测定方法 中图分类号　Ｑ８１９ 　　番茄红素是一种脂溶性天然食用色素，在化学结 过程中番茄红素可经番茄红素环化酶作用转化形成 β 构上属于类胡萝 卜素。目前，随着番茄红素的功能越 胡萝 卜素，所以在发酵过程中必须添加合适的番茄红 ［２，３］ 来越多地被人们所接受，其市场需求也随之升温，１９９９ 素环化酶阻断剂，才可以积累大量的番茄红素 。龟 年国际番茄红素交易额达１亿美元，从 １９９９年至２００５ 裂链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｒｉｍｏｓｕｓ）因产生多肽类抗生 年，世界番茄红素市场需求总量从不足３０吨迅速增加 素———土霉素而成为一种工业上重要的链霉菌，几十 到约１３０吨，年均增长３０％。番茄红素抗氧化作用是 年来龟裂链霉菌的研究主要集中于（１）土霉素产生菌 的遗传不稳定性研究；（ 目前所用抗氧化药物Ｖ 的１００倍，对抗紫外线损伤有 ２）与土霉素生物合成相关基因 Ｅ 很好的防治作用。国外如以色列、日本、美国、英国等 的分子克隆。龟裂链霉菌不仅产生抗生素，而且也可 国家已有公司将番茄红素加入高级化妆品中。番茄红 产生番茄红素，早在上世纪６０年代曾有国外文献报 ［４］ 道 ，随后国内外开展较多的是在高产 胡萝 卜素的 素还可作为天然食用色素，无毒无副作用，并且有抗氧 β 化、防癌症等效果，远优于目前市场上所用的人工合成 菌株如三孢布拉氏霉菌的基础上进行番茄红素发酵生 ［５］ 色素及其他天然色素，因而广泛应用于食品加工、饮料 产方面的研究 。由于龟裂链霉菌发酵生产番茄红素 等领域，供不应求。近来世界粮农组织（ＦＡＯ）和世界 可克服三孢布拉霉菌的缺点，具有发酵周期短、单一菌 卫生组织（ＷＨＯ）已将番茄红素正式列入食品添加剂 株发酵、无需加阻断剂等优点。本研究在国内首次利 名单，其保健功能在国际上已被充分认可。作为保健 用龟裂链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｒｉｍｏｓｕｓ）发酵生产番茄红 品在国内外已有产品销售，作为药品的申报工作也正 素，拟通过紫外诱变，进行高产番茄红素菌株的选育， ［１］ 通过培养条件