asia1 型口蹄疫病毒胶体金免疫层析检测方法的建立.pdf

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, May 25; 25(5): 767-772 Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@ © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved 生物技术与方法 Asia1 林彤, 邵军军, 丛国正, 独军政, 高闪电, 常惠芸, 谢庆阁 , 730046 : 为建立一种快速、简便、灵敏检测 Asia1 型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析方法(GICA) 。本研究采用柠檬酸三 钠还原法制备胶体金颗粒, 标记纯化的抗Asia1 型口蹄疫病毒的单克隆抗体, 将该标记物与羊抗豚鼠IgG 分别包被在硝 酸纤维素膜(Nitrocellulose membrane)上, 作为检测带和质控带。经条件优化, 组装成检测Asia1 型口蹄疫的诊断试纸条。 用该试纸条分别对A 、O 、C 和Asia1 型口蹄疫病毒抗原以及猪水泡病病毒抗原等87 份样品进行了检测, 发现该试纸条 不与口蹄疫病毒A 、O 、C 型以及猪水泡病病毒抗原发生反应, 特异性良好。用该试纸条对口蹄疫细胞毒(TCID50 为6.25) −4 。该试纸条与其他传统诊断方法的符合率为98.8% 。初步实 的 10 倍系列稀释液进行了检测, 最低可以检测到大约 10 o o 验确定该试纸条在4 C 下可保存3 个月、37 C 和室温下大概可保存 1 周左右。该试纸条是一种快速、灵敏、特异的FMD 抗原检测方法, 对现场检测具有一定实用价值。 : Asia1 型 FMDV, 单克隆抗体, 胶体金, 免疫层析法 Establishment of colloidal gold-immunochroma-togrphy assay strip for detection of type Asia1 foot-and-mouth disease virus Tong Lin, Junjun Shao, Guozheng Cong, Junzheng Du, Shandian Gao, Huiyun Chang, and Qingge Xie Key Laboratory of Animal Virology of Ministry of Agriculture, State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology, Lanzhou Veterinary Research Institute , Chines Academy of Agricultural Science, Lanzhou 730046, China Abstract: To establish a sensitive, rapid and simple gold immunochromatography assay (GICA)