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人骨肉瘤原代细胞条件培养基中骨形态蛋白(BMP)的实验研究

Abbreviations) 主要缩略语(Major AEC 3-氨基一9-乙基咔唑 3-Amino一9一Ethyl-Carbazole BMP Bone Protein 骨’形态发生蛋白 Morphogenetic CM ConditionedMedium 条件培养基 CDNA Complementary Acid DBM DecalcifiedBoneMatrix 脱钙骨基质 KD Kilodalton 千道尔顿 McAb Monoclonal 单克隆抗体 Antibody MW Molecular 分子量 Weight solution PBS balanced 磷酸缓冲液 Phosphate PEG Polythylene 聚乙二醇 glycol TGF—B GrowthFactor—B转化生长因子一B Transtbrming Sodium sulfate一 十二烷基磺酸纳 SDS—PAGE dodecyl Gel Polyacrylamide S-P 链霉菌抗生物素一过 Streptavidin.Peroxidase 氧化物酶 1 ‘p卜科技人学¨济医学院 蛳1‘学随论艾 人骨肉瘤原代细胞条件培养基中骨形态蛋白(BMP) 的实验研究 华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科 研究生 冷燕垒 导师 吴华 摘 要 【目的】 探索从人骨肉瘤细胞条件培养基中提取骨形态发生蛋白 (BMP)的方法,并测定其生物学活性。 【方法】 从临床截肢肢体中切取骨肉瘤组织,采用组织块贴壁培 养法,培养原代骨肉瘤细胞。收集人骨肉瘤细胞条件培养基,通过 定所需洗脱峰,SDS.PAGE测定其分子量,小鼠肌袋实验检测其骨 诱导活性。 【结果】 BMP单抗鉴定所提取的蛋白为骨形态发生蛋白(BMP), 鼠肌肉内产生异位骨化。 【结论】人骨肉瘤细胞条件培养基中含有骨形态发生蛋白(BMP), 分离后具有良好的生物学活性,而骨肉瘤细胞可以在体外长期培养 2 ‘卢中科技人掌M济医学院 _:长,为BMP的大量提取、临床广泛应用提供

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