胰腺癌细胞平衡核苷载体及将其阻断后对5-FU摄取的影响.pdfVIP

摘要 中文摘要 胰腺癌细胞平衡核苷载体及将其阻断后 对5-FU摄取的影响 研究生：王晶敏 导师：刘胜利 东南大学医学院 核苷载体ENTs在肿瘤细胞膜表面的数量可能与肿瘤对化疗药物耐药有关，阻断种类载 体可能影响化疗药物在细胞内的浓度。本文测定PANC—l单细胞ENTs数量，并研究阻断细胞 ENTs后对摄取5～FU的影响。 PANO-1细胞膜ENTs的定性及定量研究 uM)的 培养基中温育8min一2 hr，在荧光显微镜下直接观察细胞表面潘生丁发出的荧光。细胞培 养至约2X 10 u hr、2 7后．在含有潘生丁(100M)的培养基中温育8min、15min、lhr，收 集细胞并用乙腈裂解，荧光分光光度计测定细胞悬液中潘生r含量，再根据平行悬液中细胞 数量计算单个细胞ENTs的数量。结果：温育8min后即能观察到细胞的荧光环。潘生丁能 x10。9 很快与单细胞表面ENTs结合，15min即可达高峰(20．21t001)，相当于单细胞有1．25 X 105个ENTs，以后维持于平台。结论：用荧光法可对细胞ENTs进行定性和定量。 阻断胰腺癌细胞ENTs对5一FU在细胞内浓聚的影响 7 x 10 目的：研究阻断ENTs后对PANC一1转运5一FU能力的影响。方法：细胞培养至约2 u 后，分为ENTs阻断组和ENTs非阻断组。ENTs阻断组培养基中加入潘生丁(100M)和5一Fu n、30min、 lOOpg／nl，ENTs非阻断缀培养基中仅加入5一FU(100Pg／n1)。分别作用15mi 1 hr、2hr、4 hr后收集细胞。用乙腈裂解细胞后，毛细管区带电泳测定5一Fu含量，根据 平行悬液中细胞数量和单细胞体积计算单细胞中5-FU浓度。结果：ENTs阻断组细胞内5一Fu 75 细胞内5-FU浓度在30分钟内迅速升高并处于曲线平台，但高峰值仅达到83 4-5．33pg／nl。 胞内的浓聚。 关键词：核苷载体：潘生丁：荧光检测：胰腺癌：化疗：5一氟尿嘧啶：药物浓度：毛 细管区带电泳。 东南大学硕士学位论文 Abstract and of Nueleoside on Transporters Equilibrative QuantitativeAnalysis Qualitative 5一FU afterthe Inhibited PAN