人瘢痕角质形成细胞原代培养中胰酶配方及浓度的探讨.pdfVIP

762 中国美容医学 2012年 5月第21卷第 5期 ChineseJournalofAestheticMedicine．May．2012．Vo1．21．No．5 ·论著 · 人瘢痕角质形成细胞原代培养中胰酶配方及浓度的探讨 蒋才丽，农晓琳 (广西医科大学附属 口腔医院口腔颌面外科 广西 南宁 530021) [摘要]目的：研究不同配方及浓度的胰蛋白酶对人瘢痕角质形成细胞(Keratinocyte，K)生物活性影响。探索一种更适于瘢痕角 质形成细胞原代培养消化的方法。方法：温消化法分离瘢痕组织表皮、真皮后，分别采用 0．1％胰蛋白酶和 0．05％胰蛋白酶一0．025％ EDTA对表皮片进行消化，培养角质形成细胞，用台盼蓝染色法和 24h细胞贴壁率观察K存活率及细胞活性 结果：两种配方胰 酶消化K，细胞存活率均迭8O％以上，结果无统计学差异(P0．05)与单独使用胰蛋白酶相比，经胰蛋白酶-EDTA组消化后的细 胞贴壁率增加，结果有统计学差异(P0．05)。结论：胰蛋白酶一EDTA能较温和地消化角质形成细胞，较大程度地保留细胞活性， 与胰蛋白酶消化法相比，此方法更适合 K的消化及培养。 [关键词]角质形成细胞；胰蛋白酶；乙二胺四乙酸 [中图分类号]Q813．1 [文献标识码]A [文章编号]1008—6455(2012)O5—0762一O2 Effectofdifferentdigestionmethodsonthehypertrophicscarderivedkeratinocytesculture JIANG Cai—li，NONG Xiao—lin (DepartmentofOralandMaxillofacialSurgery，CollegeofStomatology，GuangxiMedicalUniversity，Nanning530021， Guangxi，China) Abstract：Objective Toresearchtheeffectofdifferentdigestionmethodsactedonkeratinocytesandobtainabetter one．M ethods CulturedkeratinocytesderivedfrOm hypertrophicscarusingdigestion0．1％ trypaseand0．05％ trypase with0．025％ethlenediaminetetraceticacidfEDTA)．Cellvigorwasobservedwithteypanebluestainedandcalculatedthe adherence rate in 24 hours． ResuIts Keratinocytesdigested by differenttrypase showed over80％ survivalrate． However，asignificantdifferencewasfoundonadherenceratein24hours(P0．o5)．Conclusion Digestionwith0．05％ trypasemixed0．025％ EDTAwasbetterforcultivationofkeratinocytecomparedwith0．1％trypaseusingalone． Keywords：Keratinocyte；Trypase；EDTA 在瘢痕研究中，笔者比较了两种不同的消化酶在培养原 从瘢痕组织中剥离表皮片，分别放入含 0．1％胰蛋白酶的PBS 代瘢痕角质形成细胞时的效果，报道如下。 消化液中，37℃培养箱中10min，轻柔吹打5min，和 已预热至 37℃含 0．05％胰蛋 白酶 一0．025％EDTA的PBS消化液中，轻柔 1 材料和方法