牛血铜锌超氧化物歧化酶规模化生产工艺研究.pdfVIP

摘要 本研究报道了可用十实现牛血铜锌超氧化物歧化酶(Cu，Zn--SOD)规模化生产的简便易 行新]：艺。该T艺包括红细胞连续分离和热变性、超滤、丙酮沉淀、离子交换等技术。应用该上 艺T-SOD规模化生产中，生产成本降低89．1％。SOD收率、纯度、比活等与传统方法比较无明 显差别。 新生产工艺采用碟式分离机分离红细胞，建立了快速简便的红细胞连续分离技术，分离速 度可达2000kg牛血m；以冷冻红细胞为原料制备SOD，解决了原料长期保存问题：通过铜锌盐 存在下的一次热变性方法除去血红蛋白，彻底革除传统方法中的氯仿和乙醇；利用超滤技术浓缩 提取液，减少了丙酮用量90％；通过离子交换法，进一步纯化了SOD。实验结果表明，冷冻红细 胞和新鲜红细胞制各的SOD在收率、纯度、比活等方丽无明显差别；热变性、超滤、丙酮沉淀 等各T艺步骤酶的活性以及收率基本稳定。冷冻红细胞热变性后，酶的平均总活力一般稳定在 力平均为3307万U／kg红细胞，酶回收率45．38％。新鲜红细胞热变性后，酶的平均总活力一般 稳定在86．93万U／kg红细胞；超滤浓缩后酶的总活力平均为61．05万U／kg红细胞，同收率为 73．73％；丙酮沉淀后酶的总活力平均为5135万U／kg红细胞，回收率为59．31％；DEAE梓层析后 酶的总活力平均为36．10万U／kg红细胞，酶回收率42．66％。 在内蒙占人板生化制品厂的规模化生产条件下，投料14批，共570．5kg红细胞，得到SOD 冻干粉36069．35 关键词：牛血，铜锌超氧化物歧化酶(Cu，Zn--SOD)，新1=艺，废弃物资源化 Abstract andconvenient thatcanbeusedtorealizethe This a new technology studyreported simple bovineblood．The large-scaleproductionofcopper／zinc ofred suchascontinuous cell， includestechnologies technology productionprocedure many separation and etc．The cost ionic heatdenaturation，ultrafiltration，acetoneexchange SOD‘producing deposition the was at ina canbereduced89．1％when factory． by technologyappliedlarge—scale a thedisc ofred fastand with technology separator，continuousseparation Byestablishingsimple from resultsshowedthe ratereached bovine freezen cell