脑特异性高表达蛋白TMEM59L诱导细胞凋亡的机制研究.pdfVIP

摘要 摘要 细胞凋亡(Apoptosis)是指细胞在受到内、外信号刺激后出现的一种自发 的死亡过程，是一种主动的、高度有序的、由基因控制以及一系列酶参与的过程。 目前发现的细胞凋亡途径主要有死亡受体途径、Caspase依赖的线粒体途径、内 质网应激途径，以及Caspase非依赖的线粒体途径。其中Caspase依赖的线粒体 途径，又称内源性途径，为经典凋亡途径之一。细胞凋亡不仅在个体的正常发育 中起着重要作用，而且与癌症、免疫系统疾病、神经系统病变等疾病的发生密切 相关。 TMEM59L为新发现的脑特异性高表达蛋白，这种组织表达特异性预示该蛋白 可能在大脑中起着重要作用，但目前关于该蛋白的生理／病理功能都还不清楚。 2005年Mannherz0等报道TMEM59L具有促凋亡效果，但对其凋亡机制没有更深 入的报道。在本论文中，我们构建了TMEM59L重组质粒，通过免疫荧光方法与去 糖基化实验发现TMEM59L定位于内质网，并且可以被低糖基化。同时，我们在 v-FITC／PI双染法确定了TMME59L HEK293T细胞中过表达TMEM59L，用Annexin 可以诱导细胞凋亡，之后用免疫印迹方法检测细胞内凋亡相关分子激活情况。结 果显示，外源TMEM59L可以降低Bcl-2的表达，诱导细胞色素c释放进入细胞质， 是通过Caspase依赖的线粒体途径诱导细胞凋亡。此外，我们用神经毒性分子 A mRNA水平增加， B处理人神经母细胞瘤细胞SY5Y，发现A母处理可诱导TMEM59L 表明AB毒性作用与TMEM59L相关。 综上所述，我们的结果初步揭示了TMEM59L诱发细胞凋亡的分子机制，并发 现其可能参与了AB的神经毒性，这些研究为今后进一步阐明TMEM59L参与AD 发病的作用机理奠定了基础。 关键词：TMEM59L；内源性凋亡途径；p-淀粉样蛋白 Abstract Abstract is death internal a ordered aftercellsarestimulated Apoptosishighly process by andexternaldetrimentalfactorsandiscontrolledaseriesof and by genesenzymes． cell havebeen Multipleapoptoticpathways identified，includingCaspase—dependent mitochondrial mitochondrial receptor pathway,Caspase-independentpathway,death reticulumstress an pathway,endoplasmicpathway,etc．Dysregulatedapoptosisplays rolein diseases，such嬲cancer,immune importantmany diseases． TMEM59Lisa membrane·-anchoredof newly·-foundbrain-specific protein unknown