菌根菌生物量定量方法浅谈.docVIP

菌根菌生物量定量方法浅谈摘要：菌根菌成为当今菌物界研究的热门之一，对其生物量的准确定量也一直是人们研究的方向，但由于外生菌根菌的特殊生态型，人们对其生物量的研究仍然处于初始探索阶段，文章总结论述和分析了关于外生菌根菌生物量研究的意义和常用的测定方法，以求为菌根菌生物量定量方法的选择运用提供科学参考。 关键词：菌根；菌根菌；森林生态系统；生物量 中图分类号：S723.13 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2011）-07-0272-2 0 前言 森林作为强大的能源库与地球生物圈的承载能力密切相关，人们在研究森林生态系统中林木资源的同时，还应注重对系统中生物之间关系的研究。现在菌根菌类微生物在森林生态系统中的作用、功能和影响已经成为人们研究的对象。菌根是指土壤中真菌与植物根系建立的具有共生关系的菌－根共生体，植物根系被菌类包围，并在土壤中形成网络，这些与根系相结合的菌类称为菌根菌。菌根菌在培育森林树木以及抵抗和延缓森林衰退等方面已经受到人们的关注[1,2]。我国对菌根菌资源的研究比较晚，现在还处于初级阶段，但最近对于菌根菌相关的资源调查也有不少报道。在调查中人们大多注重对菌根菌种类和生态分布等方面的研究，孰不知菌根菌不仅是森林树木的重要共生菌，对树木的生长调节起到了不可估量的作用，从生态系统物质循环的角度来看它也具有很高的研究价值。测定生物量和评价生物的生产力，对综合利用其生物资源了解和研究该生物与其所在生境的各因素的关系，乃至其在生态系统中的生态幅和生态位以及它在生态系统中物质循环中所起到的作用都有着十分重要的意义，但对于生态系统中共生菌生物量定量的相关研究仍处于不成熟的阶段，相关调查研究的报道还很少。本文对外生菌根菌的生物量主要的测定方法进行阐述，并对影响菌根菌生物量测定的因素做了总结，为我国在外生菌根菌的研究方面提供参考。 1 生物量的研究方法分析 目前人类对真菌生物量的测定方法有许多种：计数法、细胞成分分析法、细胞壁成分分析法、细胞质成分分析法、生物量碳、生物量氮、生物量磷、生物量硫、底物诱导法、热释放法等[3]。但由于外生菌根菌属于共生菌，将其完整的分离观察和进行培养基离体培养比较困难且不能反映其在自然环境中的生物量积累。测定外生菌根菌生物量的方法通常是采用Harley和McGready（1952）的方法，随着研究方法手段的进步麦角甾醇分析法、磷脂分析法、几丁质分析法以及DNA和RNA分析法等方法也被用于测定外生菌根菌的生物量，Renske Landeweert等通过利用PLFA方法[4]，研究了土壤群落中菌根真菌菌丝体和细菌之间的相互关系，也对外生菌根真菌的生物量做了计算。 1.1 FSA生物量测定法分析 Harley和McGready（1952）的方法测定外生菌根中共生菌的含有率仍然是人们普遍采用的测定菌根菌生物量的方法，即称量所剥离山毛榉菌根的菌鞘，求得的值为40%。但这只不过是对一个植物种，用一种方法所求得的值。对此方法的准确度许多学者也有不同的看法并进行了研讨。外生菌根中的共生菌含有率是跟测定方法、植物的种类以及发育阶段等均有着密切的联系，也因共生菌的菌种等因素而异。2007年日本学者木下晃彦为了证明因树种不同而导致FSA的不同，对日本的亚寒带到温带的针叶树种（1科4属6种）和阔叶树种（2科3属7种），共计13个种进行了树种采集和菌根菌生物量的测定，结果针叶树种的FSA平均值为23.2±0.6%，阔叶树的为26.4±0.5，明显高于针叶树种。另一方面，针叶树种在近亲种之间显示的FSA值较为接近。而阔叶树中近缘种之间则出现了明显差异。阔叶树FSA值之所以大于针叶树，是由于针叶树菌根半径和菌鞘厚度都较阔叶树的大，但就针叶树和阔叶树的菌鞘厚度比较而言，远达不到两者菌根半径相差的程度（菌鞘厚度比例与菌根半径比值相比较）。就针叶树而言主要是菌根半径决定了FSA值（FSA值与菌根半径成反比，菌根半径愈大，FSA值愈小）。阔叶树的FSA则取决于菌鞘厚度，即菌鞘越厚的，FSA就越大。由此阐明了菌根菌含有率因树种而异，即针叶树和阔叶树树种之间的不同是影响FSA的主要因素之一。选用代表树种针叶树种中日本冷杉、赤松和阔叶树种中的山毛榉、?栎，通过比较可以看出日本冷杉和?栎的成年树的FSA值明显高于其实生苗。赤松及山毛榉成年树FSA值分别是24.6±1.3%和24.7±1.9%，而此两者实生苗的FSA值分别为25.5±2.1%、27.8±1.4%，从两树种的成年树和实生苗FSA值中能看到成年树和实生苗的菌根共生菌含有率差异显著[5]，我们可以这样考虑，对于日本冷杉和?栎而言，FSA值是随树龄的增加而增加的，而菌鞘厚度的增加应该是与共生菌的菌种和菌种数的变化密切相关，这同样