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拟南芥aterf1 蛋白的原核可溶性表达及多克隆 - 上海师范大学学报
4 2 4 ( ) Vol ． 4 2 ，No ． 4
第 卷第 期 上海师范大学学报 自然科学版
2 0 1 3 8 Journal of Shanghai Normal University (Natural Sciences) Aug ． ，2 0 1 3
年 月
拟南芥AtEＲF1 蛋白的原核可溶性表达及
多克隆抗体的制备
*
， ， ， ，
张 钰 李亚会 屠唯一 陈 晨 高菊芳
( ， 200234)
上海师范大学生命与环境科学学院 上海
: AtEＲF1 EＲF / AP2 B3 ， ．
摘 要 转录因子 属于 家族的 亚家族 参与植物的防卫反应 根据密码
， AtEＲF1
子简并原理 用基因全合成的方法合成了满足大肠杆菌密码子嗜好的编码拟南芥 蛋
， pET － 29b． AtEＲF1 － pET － 29b
白的碱基序列 并将其克隆到原核表达载体 将表达载体 转入
BL21 (DE3)，IPTG 30kD AtEＲF1 ，
大肠杆菌 用 成功诱导表达了分子量约 的 蛋白 该蛋白主要
以可溶性蛋白的形式存在． ，
以该蛋白为抗原免疫家兔 制备出的多克隆抗体经免疫双扩散测定
效价达1∶ 16 ，Western blot 检测表明该抗血清与AtEＲF1 蛋白识别良好． AtEＲF1 抗体的制备为
进一步从生化水平上研究AtEＲF1 的功能奠定了良好基础．
: ; ;AtEＲF1 ; ;
关键词 原核表达 拟南芥 蛋白 密码子优化 多克隆抗体
: : :
中图分类号 Q 786 文献标识码 A 文章编号 1000-5137 (2013)04-0378-06
0 引 言
EＲF (ethylene responsive factor)是植物所特有的一类转录因子． EＲF 家族成员在结构上有共同的特
点: 60 DNA ， EＲF
每个成员都含有一个大约由 个氨基酸组成的非常保守的 结合域 含有 结合域的转录
［1］
， ．
因子在植物中广泛存在 并且参与植物的生长发育及生理生化反应的信号转导 植物防卫信号传递
:
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