具有谷胱甘肽过氧化物酶活力的含碲环糊精衍生物 - chemical journal .pdf

Vol.34 高等 学校 化 学 学报 No.9 2013年9月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICALJOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES摇 摇 摇 摇 摇 摇 2146~2151 doi:10.7503/ cjc 摇 摇 具有谷胱甘肽过氧化物酶活力的 含碲环糊精衍生物 1 1 2 1 1 1 吕冰聪 ,董摇 森 ,薛摇 峤 ,宗摇 慧 , 吕绍武 ,罗贵民 (1. 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,长春 130012; 2. 吉林大学理论化学计算国家重点实验室,长春 130023) 摘要摇 设计并合成了谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)模拟物 6A,6A忆鄄二苯胺鄄6B,6B忆鄄二碲桥联鄄茁鄄环糊精 (6鄄AnTeCD),采用双酶偶联法进行 GPx 活力测定和酶反应动力学分析,通过噻唑蓝(MTT)比色法评价了 6鄄AnTeCD对H O 诱导心肌细胞氧化损伤的保护作用. 结果表明,6鄄AnTeCD催化谷胱甘肽(GSH)还原过氧 2 2 化氢(H O )的活力高于6鄄AnSeCD、6,6忆鄄二碲桥联鄄茁鄄环糊精(6鄄TeCD)和Ebselen等GPx模拟物. 稳态动力学 2 2 分析显示,6鄄AnTeCD的催化机制为乒乓机制. 6鄄AnTeCD分子兼具引入底物结合部位和改造催化部位的双重 优点,具有分子量小、毒性低及可有效保护心肌细胞免受氧化损伤的优点. 关键词摇 谷胱甘肽过氧化物酶模拟物;底物结合;催化部位改造;含碲环糊精 + 中图分类号摇 O627郾6 1摇 摇 摇 摇 文献标志码摇 A 谷胱甘肽过氧化物酶(GPx,EC.1.11.1.9)是生物体内最重要的抗氧化酶之一,具有维持体内活 [1] 性氧(ROS)平衡的重要作用,对预防和治疗心血管病、 白内障、炎症及癌症等有明显效果 . 但天然 GPx稳定性差,并且其催化中心硒代半胱氨酸(Sec)由终止密码子UGA编码,难以用基因工程方法量 产限制了其应用,因此GPx模拟物成为抗氧化治疗的研究热点[2~6]. GPx 的小分子模拟物集中在改造 [7,8] 催化部位上,主要表现为两方面研究 :(1) 通过改变催化基团硒(Se)与N或O等原子的相互作用 力调节Se 的氧化还原微环境;(2) 将催化基团Se替换为同族元素碲(Te),获得比催化中间体硒醇更 [9,10] [11] [12,13] 易被氢过氧化物氧化的碲醇. 本研究组近年采用单链抗体 、生物印记 、天然酶功能转换 及 茁鄄环糊精(茁鄄CD)[2,14~16]等制备的GPx模拟物均证实高效的GPx模拟物需具有特异性的底物结合部位. [16] 基于调节催化基团Se 的氧化还原微环境和引入底物结合部位的原理,前文 设计合成了6鄄AnSeCD 分子. 在该分子中,引入到催化基团Se附近的苯胺基可发挥稳定催化过渡态的作用,而茁鄄CD 的疏水 空腔同时提供了底物结合作用. 基于上述理论和实验结果,本文设计合成了兼具引入底物结合部位和 改造催