在蔗糖预培养诱导耐脱水性过程中黄皮胚轴的水分状态和可溶性蛋白 .pdf

植物生理与分子生物学学报,Journal of Plant Physiology and Molecular Biology 2006, 32 (2): 245-251 245 在蔗糖预培养诱导耐脱水性过程中黄皮胚轴的水分状态和可溶性蛋白含 量的变化 1* 2 3 黄雪梅 ，宋松泉 ，傅家瑞 1 2 3 华南农业大学园艺学院，广州510642； 中国科学院西双版纳热带植物园，勐腊666303； 中山大学生命科学学院，广州510275 摘要：逐步增加培养基的蔗糖浓度可提高黄皮胚轴的耐 水量范围内均可发生玻璃化(Sun等1994)，这使脱水 脱水性。用差示扫描量热仪(DSC)和SDS方法探讨 耐性与水分状态的关系变得复杂。 了黄皮胚轴在耐脱水性获得过程中的水分状态和可溶性 正常性种子在发育后期大量合成的LEA蛋白 蛋白的变化。DSC图谱显示，蔗糖预培养胚轴的升温图 胚胎发育后期高 谱与对照不同，有比较明显的台阶式变化，有玻璃化形成 的倾向；应用线性回归方程法或冰熔化热法计算黄皮胚 丰度表达的蛋白)被认为与种子脱水耐性有密切关 轴的不可冻结水，发现蔗糖预培养胚轴的不可冻结水含 系。在发育后期随着LEA蛋白的合成和积累种子变 量与对照胚轴无显著差异。蛋白分析表明，蔗糖预培养诱 得愈来愈耐脱水；种子萌发后脱水耐性消失，并伴 导黄皮胚轴中可溶性蛋白增加68%，其中尤以20 kD蛋白 随着发生LEA蛋白的降解(Ried和 的增幅最大。 1993);高度顽拗性种子在发育过程中不合成LEA蛋 白，脱水也不能诱导新蛋白的合成(Farrant等1992; 关键词：黄皮胚轴，耐脱水性，水分状态，可溶性蛋白 中图分类号：Q945 Han等1997);但是，某些温带植物的顽拗性种子也 能合成LEA蛋白(Farrant等1996)，所以种子中LEA 正常性种子中的水分有明显的自由水和束缚水 蛋白并不是决定脱水耐性的唯一因素，脱水耐性可 之分，而顽拗性种子中的水分则无(Vertucci 1990)， 能是一种数量性状，由LEA蛋白与其它的因子共同 这可能是二者对脱水敏感性程度不同的直接原因。 决定(Vertucci和 和Berjak 1999)。 正常性种子的束缚水一般不超过10%，它通过离子 逐步提高培养基的蔗糖浓度可诱导黄皮胚轴耐 键与大分子表面紧密结合，几乎成为种子中物质化 脱水性的提高。黄皮胚轴脱水至含水量20%以下仍 学结构的一部分，脱水时很难失去；而顽拗性种子 则可能缺乏这种与大分子物质紧密结合的水，在脱 可长成幼苗(Fu等2003);细胞超微结构观察显示，蔗 糖预培养可减轻脱水对黄皮胚轴亚细胞结构的损伤， 水时不能保留这种水，因而发生脱水伤害(Vertucci 并且有利于重新吸水时修复脱水损伤(黄雪梅等 和Leopold 1987)。 2004)。本文进一步研究黄皮胚轴耐脱水性获得与水 用差示扫描量热仪(differential scanning 分状态和可溶性蛋白的关系。 calorimetry, DSC)技术