叶绿体中色素的提取和分离实验浅析.pdfVIP

第1O卷第3期 辽宁师专学报 V01．1ONo．3 2008年 9月 JournalofLiaoningTeachersCollege Sep．2008 【实验技术研究】 叶绿体中色素的提取和分离实验浅析 张丽敏 (阜新高专 ，辽宁 阜新 123000) 摘 要：叶绿体中色素的提取和分离实验首先要选好材料，关键步骤是制备好滤纸条，注意加碳酸钙的 量，在过滤时要用单层尼龙布，在滤纸上画滤液线时要确保画的细而直，操作时滤液线不能接触到层析液．在 实验过程中，教师需对学生加强环保意识教育，降低实验对环境的污染，确保师生身体健康． 关键词 ：叶绿体 ；色素 ；提取 ；分离 一 中图分类号：Q一33 文献标识码 ：A 文章编号：1008—5688(2008)03—0101—02 叶绿体中色素的提取和分离实验是高职生物实验教学的重要内容 ，实验过程是利用绿色植物 中叶绿体 色素的某些物理性质将其提取出来，然后用纸层析法将其分离．由于实验操作过程中往往存在一些影响实 验效果、对学生健康不利的问题，现提出一些解决措施． 1 准备工作 1．1 选材 在叶绿体中色素的提取和分离实验中，选材是做好整个实验的关键步骤It]． 1．1．1 采用研磨法提取色素 选用陆地蔬菜作为实验材料 ，如空心菜、菠菜、大白菜、萝 卜等叶片均可 ，但以菠菜的叶片最佳 ，其 次选用鲜嫩、颜色浓绿的空心菜 、萝 b的叶片为好．选用以上实验材料主要是由于 ：(1)陆地蔬菜比大棚 蔬菜的色素含量多、水分含量少、受化肥和农药污染程度低 ，使色素的提取和分离免受干扰；(2)菠菜 、 空心菜、萝 卜、大白菜等蔬菜的叶面角质层薄，无蜡质层，容易研磨，易于叶绿素的提取；(3)菠菜的叶 肉厚、叶绿素含量高，因此色素析出多．另外，菠菜价格便宜，一年四季都容易获得，物美价廉 ，这也是 选取实验材料时的主要考虑因素 ． 1．1．2 采用绿叶压汁法提取色素 选取泡桐、夹竹桃、杨树等叶片作为实验材料，主要是由于这几类植物的叶片含水少、新鲜浓绿，其 叶片角质层较厚 ，用镊子柄压片取汁时滤纸条不易浸湿 ． 1．2 制备滤纸条 (1)实验中要求学生在距滤纸条一端 1cm处用铅笔画一条细而直的横线 ，并从该端剪去两角 ．毛细 现象会使滤纸两个角的色素扩散 比中间的快些，这是由于滤纸两边的溶剂分子可以从前、后和侧面三个方 向向上扩散 ，因此 向上扩散的速度就较快 ，而滤纸条中间的溶剂分子只能从前、后两个方 向向上扩散 ，因 此色素分子扩散速度较慢，导致色素带的两边和 中间不在一条直线上．剪去滤纸条两角后，可以在一定程 度上加快中间色素的扩散速度 ，减慢两边色素的扩散速度，从而在实验 中获得比较理想的色素带． (2)制备滤纸条的长度、宽度应尽量一致，减少人为因素造成的误差．具体做法是将干燥的滤纸叠在 一 起 ，同时剪取 4～6条 ． 2 实验过程 2．1 加碳酸钙的量与作用 实验中，在将菠菜研磨成浆时要加入少量碳酸钙 ，由于教材中只介绍加入碳酸钙是为了防止研磨时叶 绿体中的色素受到破坏 ，而未说明本质原因，使学生对加入碳酸钙的作用机理不 了解 ，导致学生认为多加 少加无所谓．实验中由于研磨会使细胞结构遭到破坏 ，导致呈微酸性 的细胞液流出，由于叶绿体 中的色素 所处的环境具有微碱性，因此微酸性的细胞液就会直接接触叶绿体中的色素 ，破坏叶绿素的分子结构，使 收稿 日期 ：2008—03—20 作者简介：张丽敏 (1964一)，女，辽宁阜新市人，讲师，主要从事生物学教学研究 102 辽宁师专学报 2008年第 3期 叶绿素失镁 ，呈黄褐色 ，所 以加入少许碳酸钙主要是中和细胞液的酸性 ，起到保护叶绿素的作用 ．加入碳 酸钙的量要适度 ，加少了不能完全中和细胞液的酸性 ，加多了会导致溶液混浊，碳酸钙与菠菜合适的质量 比约为 1：20． 2．2 用单层尼龙布过滤 学生在做实验时，往往只注意用尼