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ABRO1和THAP11的相互作用 徐婧 2012-11-5 THAP蛋白家族成员 THAP11蛋白染色体定位 THAP11研究背景 Distribution of THAP11 mRNA in human adult issues: THAP11研究背景 THAP11 is downregulated in HCC patients: THAP11抑制肿瘤集落形成 THAP11研究背景 THAP11抑制肿瘤集落形成 THAP11抑制mRNA剪接 THAP11下调c-Myc抑制 细胞增殖 THAP11是生长抑制基因,是潜在的抑癌候选基因 THAP11研究背景 ABRO1 ABRO1 THAP11是否调控该复合体？ ABRO1 NBA1 BRCC36 BRE THAP11 THAP11 实验方案 GAPDH THAP11 293T cells 过表达ABRO1上调内源THAP11表达 F-Abro1 工作进展 Flag-ABRO1 Flag-ABRO1 THAP11 GAPDH Flag(1μg): + + + + - - - - FAbro1(1μg): - - - - + + + + CHX(h): 0 8 16 24 0 8 16 24 工作进展 过表达ABRO1上调内源THAP11表达 ABRO1 GAPDH THAP11 Control –shRNA(1μg): + + + + - - - - ABRO1-shRNA( 1μg): - - - - + + + + CHX(h): 0 8 16 24 0 8 16 24 G2 cells 工作进展 敲低ABRO1下调内源THAP11表达 Thanks~ * THAP11属于新发现的THAP（Thanatos-associated protein）蛋白家族。 THAP11定位在全细胞。用肿瘤多组织cDNA微阵列芯片检测发现，THAP11在多种肿瘤组织表达明显低于相应的癌旁组织，在癌细胞系中THAP11的内源性表达水平也很低，因此我们推测THAP11可能参与细胞增殖调控。利用构建的可诱导表达THAP11的HEK293稳定细胞株，我们研究了THAP11对细胞行为的影响，发现诱导THAP11表达，可明显抑制HEK293细胞增殖。此外，在7721、HeLa、MCF-7细胞中过表达THAP11也能引起集落形成能力明显下降。上述结果说明，THAP11是生长抑制基因。 THAP11通过抑制c-myc转录改变了此类基因的表达，引起细胞生长阻滞。 * 有效的抑制c-myc及其下游基因的活性常被作为体内治疗这些肿瘤的策略； 而那些能够抑制c-myc发挥转录活性的基因也备受关注。它们表达后能抑制细胞过度生长、增殖； 相反，丢失或失活很有可能引起c-myc的表达失控最终导致肿瘤发生，因此这些基因往往是抑癌候选基因。 THAP11定位在染色体16q22.1，这是一个与肿瘤发生密切相关的染色体区域。THAP11能抑制c-myc启动子转录活性， 进而引起c-myc蛋白表达下降， THAP11可以下调c-myc的转录，引起其下游与代谢、蛋白质合成等相关的部分靶基因转录受到相应的抑制，进而导致细胞增殖阻滞， THAP11抑制c-myc启动子转录的区域定位在P2启动子上游-710bp ~ -484bp THAP11表达抑制细胞DNA合成，过表达能抑制肿瘤细胞的集落形成；THAP11在不同组织 的肿瘤中表达情况差异大，THAP11虽然分布没有组织特异性，但它的功能在不同的组织当中可能是不一样的； * 有效的抑制c-myc及其下游基因的活性常被作为体内治疗这些肿瘤的策略； 而那些能够抑制c-myc发挥转录活性的基因也备受关注。它们表达后能抑制细胞过度生长、增殖； 相反，丢失或失活很有可能引起c-myc的表达失控最终导致肿瘤发生，因此这些基因往往是抑癌候选基因。 THA