细胞朊蛋白.ppt

* 通过检查动物或人脑组织标本中的内基小体，可以辅助诊断狂犬病。 * 来源于世界各地的狂犬病病毒分离株的抗原性不同。根据病毒表面糖蛋白G的抗原性差异，狂犬病病毒可分为5个血清型。 * 对家兔的致病性增强，对人或犬的致病性明显减弱；并且从脑外途径对犬进行接种时，不能侵入脑神经组织引起狂犬病。 * * 人被狂犬咬伤，发病率为30%～60%。咬伤后能否发病，与受伤部位、伤势程度及病畜唾液中的病毒量有关： 潜伏期通常为3～8w。短者10d，长者可达数年。 咬伤部位距头部愈近、伤口愈深、伤者年龄愈小，则潜伏期越短。 * 接种疫苗所获得的防止发病效果可能与此有关。但抗体对已进入神经细胞内的病毒难以发挥作用。同时也可能产生免疫病理反应而加重病情。 * 人患狂犬病，根据被动物咬伤史并结合典型的临床症状可做出诊断。所以，病人进行微生物学诊断的实际意义不大。 将咬人的可疑动物捕获后，隔离观察7-10d。如动物不发病，一般认为该动物未患狂犬病或咬人时唾液中不含狂犬病病毒。因而被该动物咬伤的人也不需预防注射疫苗。 如观察期间发病，可杀死取脑组织做切片或涂片，用免疫荧光抗体法检查病毒抗原，同时做组织切片检查内基小体。也可将动物脑组织制成10%的悬液，接种于小鼠脑内待发病后取脑检查内基小体或病毒抗原，可提高检出阳性率。 但人被犬或其他动物咬伤后，检查动物是否患有狂犬病，对采取防治措施极为重要。 潜伏期3-8 w至数年，疫苗刺激机体产生免疫过程约4 w * * * * * 病原体进入牛的食物链是主要的致病因素，牛食用了含羊瘙痒病的羊骨肉粉或牛骨肉粉而导致疯牛病的蔓延。1988年7月英国政府立法禁止用反刍动物来源的饮料喂养牛后，疯牛病的发病率已呈下降的趋势。 * 从这些病例中提取的PrPSC与来源于BSE的PrPSC的性质相同，患者脑组织的病理变化与BSE相似，从而表明v-CJD与疯牛病密切相关。现在普遍认为v-CJD的来源可能是人食物链中含有疯牛病的致病因子所致，但确切的致病机制尚不清楚。BSE和v-CJD的出现已受到国际社会的广泛关注。 * 取可疑患者的脑组织或非神经组织切片，经脱水性或水解性高压消毒、甲酸和硫氰酸胍处理，使其感染性消失并破坏PrPC后再用单克隆抗体检测对上述处理有抗性的PrPSC。 是一种不含核酸和脂类的疏水性糖蛋白。 细胞朊蛋白(cellular isoform of PrP, PrPC)： 正常人和动物的神经细胞编码的一种糖基化膜蛋白，分子量为33-35?103，称为PrP33-35，命名PrPC，它对蛋白酶、去污剂敏感。 羊瘙痒病朊蛋白(scrapie isoform of PrP, PrPSC)： 分子量为27-30?103，称为PrP27-30，能抵抗蛋白酶的消化作用。 PrPC和PrPSC的一级结构完全相同，但其空间结构不同 一）生物学性状 PrPc PrPsc 分子构型 4个α-螺旋， 无β折叠 2个α-螺旋 4个β折叠 对蛋白酶K抗性 敏感 抗性 存在 正常及感染动物 感染动物 致病性 无害 具致病性与传染性 PrPc和PrPsc主要区别 对理化因素的抵抗力强 对甲醛、乙醇、蛋白酶和放射性核素等具有抵抗力 消毒常用5%次氯酸钠或2 mol/L的氢氧化钠浸泡手术器械2 h，高压灭菌需用202 kPa、134 ℃处理1 h，以彻底灭活朊粒 一）生物学性状 抵抗力 共同特征：潜伏期长（可达数年至数十年之久）一旦发病即呈慢性进行性发展，最终死亡。 病理特点：朊粒致中枢神经系统退化性病变，大脑和小脑的神经细胞融合、消失，形成多数小空泡并伴有星状胶质细胞增生，出现海绵状改变为特征，病变部位无炎症反应，而是由朊粒蛋白（PrP）大量堆积在神经组织里，形成淀粉样斑块 二）致病性与免疫性 脑组织海绵样改变，空泡形成 临床表现：痴呆、共济失调、震颤等中枢神经系统症状。 致病机制：未明。目前认为，PrPC转变为PrPSC是疾病发生的基本条件，PrPSC在中枢神经系统细胞内聚集而导致疾病的发生。 二）致病性与免疫性 动物prion病 人类prion病 羊瘙痒病 (scrapie of sheep and goat) 库鲁病 (Kuru disease) 水貂传染性脑病(transmissible mink encephalopathy,TMM) 克-雅病 (Creutzfeld-Jakob disease, CJD) 鹿慢性退行性变(chronic wasting disease of deer, CWD) 格斯特曼综合征(Grestmann-Straussler Syndrome,GSS) 牛海绵状脑病(bovine spongifo