结构基因组学研究中的亲和接头.pdfVIP

( ) 第 26卷第 1期 重庆工商大学学报 自然科学版 2009年 2 月 Vo l. 26　NO. 1 　　　　　　　　J Chongqing Techno l Bu sine ss U n iv. (N at Sci Ed) 　 　　　　　　　 Feb. 2009 　　文章编号 : 1672 - 058X (2009) 0 1 - 006 1 - 04 结构基因组学研究中的亲和接头 1 2 姜怀春 , 李 　宏 ( 1. 重庆工商大学 学报编辑部 , 重庆 400067; 2. 重庆教育学院 生命科学与化学系 , 重庆 400067) 摘 　要 :介绍了亲和接头在高通量生产 目标蛋白质中的运用 ,这些亲和接头包括 6 组氨酸 、麦芽糖结合 蛋白、谷胱甘肽 - S - 转移酶和硫氧还蛋白,并讨论了高通量生产的蛋白质的溶解和复性 。 关键词 :结构基因组学 ;亲和接头 ;融合蛋白 中图分类号 : Q 34　　　　　　　　文献标识码 : A 由于普通蛋白质含量低 ,难于纯化 ,更难于得到结晶水平的蛋白质纯度和蛋白质量 ,所以一些科学家使 用蛋白质亲和接头进行大规模地高通量生产 目标蛋白,然后 ,进行结构基因组学研究 。 ( ) 1　用大亲和接头 large - affin ity tags 超表达 目标蛋白质 把 目标蛋白质融合到亲和接头上 ,能增加蛋白质的表达 ,增加蛋白质的溶解性 ,保护 目标蛋白质免受蛋 白酶水解 ,增进蛋白质折叠 ,然后 ,用亲和层析很容易对带有接头的目标蛋白质进行纯化 。但是 ,这种融合蛋 ( ) 白接头诱导的构象异质性 conform ational heterogeneity 阻碍晶体生长 , 需要把接头去掉才能用于晶体生 长 [ 1 ] 。 [ 1 ] ( ) Sm yth等 认为融合蛋白质 fu sion p rotein或 ch im eric p rotein 被广泛用于蛋白质研究的许多方面 ,如生 ( 物化学中的纯化 、免疫检测 、蛋白质治疗 、疫苗开发 、功能基因组学 、蛋白质运输分析 analysis of p rotein traf fick ing) 、蛋白质 - 蛋白质或蛋白质 - 核酸相互作用 [ 2 ] 。 ( ) 在结构生物学研究中 ,常常需要毫克水平的均一性蛋白质样品 homogeneou s p rotein samp le , 目前 , 最